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闽北职业技术学院食品与生物工程系 仪器分析 第七章 高效液相色谱法 学习目标 1、掌握HPLC的分离原理、高效液相色谱分析的样品处理方法、分离方式的选择和定量分析方法及HPLC实验技术。 2、了解高效液相色谱仪的构造、仪器各部分的功用及仪器的维护和保养，熟悉其工作过程及常用固定相及流动相的特性及选用原则。 High Performance Liquid Chromatography 高效液相色谱分析法 一、液相色谱分离原理 特指一种用液体为流动相的色谱分离分析方法。 液体待检测物被注入色谱柱，通过流动相推动，在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质以不同的顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。 第一节 高效液相色谱分离的原理 1、液相色谱分析法 2、液相色谱法分类 1）液-液分配色谱法（LLC） 2）液-固吸附色谱法（LSC） 3）离子交换色谱法（IC） 4）空间排阻（凝胶）色谱法 1）液-液分配色谱法（LLC） 分离机制：利用组分在两相中溶解度的差异实现分离。 固 定 相： 载体+固定液（物理或机械涂渍法）。 缺 点：系统内部压力大，易流失，不实用。 极性固定液→NLLC，非极性固定液→RLLC 正相色谱——固定液极