nanos2综述.docVIP

Nanos2基因的研究进展 摘要：Nanos是最先被鉴定的一个母源效应基因，后来在其他生物中都发现有其同源物存在，主要作用是促进性腺的发育。不同物种或同一物种不同的nanos同源物的功能和作用机制都不尽相同。在小鼠中nanos有三个同源物nanos1，2，3.Nanos1在性腺和脑组织中都有表达，nanos2和Nanos3具有生殖特异性，只在性腺中表达，尤其是nanos2，在生殖细胞发育过程中不可或缺。Nanos2不仅维持PGC和SSC的自我更新，而且是一种启动雄性分化程序的内源性因子，在胚胎发育时期只表达于雄性生殖细胞中。了解nanos2的功能和作用机理有助于让我们对胚胎发育过程和性别决定调控有更清楚的认识。 关键词：nanos2 精源干细胞 性别决定 自我更新 Nanos基因最早由 在果蝇中发现，它编码一种RNA结合蛋白，这种蛋白与pumilioRNA结合蛋白相互作用形成一种核糖核蛋白复合物一起抑制母源mRNA hunchback的翻译，从而调控果蝇胚胎后腹部细胞的分化。进一步研究表明nanos对果蝇生殖细胞的发育是必须的，Nanos基因的缺失将使果蝇不能形成性腺，产生异常生殖细胞。随后，科学家在线虫、蜜蜂、家蚕等物种中也相继发现nanos同源物，它们的功能也都和个体发育或生殖细胞的发育分化有关。小鼠中含有三个nanos的同源物，分别命名为Nanos1，2，3。其中Nanos1在小鼠胚胎、成体睾丸和脑组织中都有表达。Nanos1基因敲除的小鼠并没有发现性腺的异常，说明Nanos1对小鼠性腺的发育不是必须的或其功能可以被其他基因代替。Nanos2和nanos3都是生殖细胞特异性的，其基因敲除的小鼠都不能形成正常的性腺，成体中Nanos2或Nanos3的缺失将导致生殖细胞的丢失。Nanos3在胚胎期两性中都有表达而Nanos2只在雄性中表达，因此，Nanos2是一个严格的雄性生殖特异性基因。本文就对Nanos2的结构, 功能以及分子机制等方面做一简述。 一Nanos2的结构 Nanos基因在不同物种中差异较大，介于几十到上千bp不等。Nanos2基因全长1439，只含有一个外显子，无内含子，编码区长为410 bp，在靠近C端的序列编码了两个特异锌指结构域CCHC（Cys-Cys-His-Cys），这两个特异锌指结构域在目前发现的所有物种的Nanos基因中都是高度保守的。同时敲除这两个锌指结构域将使Nanos基因功能丧失。 Nanos2的非编码区3＇UTR部分长为900 bp, Yaga等（ ）通过基因敲除比较含有和不含nanos2 3＇UTR部分的小鼠，发现不含3＇UTR部分的小鼠曲细精管中生殖细胞的数量明显少于含有3＇UTR部分的小鼠，这表明在没有3＇UTR部分的情况下肯定有一部分生殖细胞凋亡了。据此可以推断Nanos2表达水平对正常精子的发生是必须的，而Nanos2的3＇UTR部分对这个过程起着调控作用。另外，在基因敲除的小鼠中导入含有报告基因Lacz和nanos2含有3＇UTR部分的载体，检测到Lacz在两性细胞中都有表达，但Nanos2只在雄性细胞中表达，暗示3＇UTR部分在雄性中上调Nanos2的表达水平，在雌性中下调nanos2的表达水平，推测3＇UTR部分可能存在不同的增强子结合区。前面说到的那部分丢失的细胞可能是因为Nanos2表达缺失导致的细胞凋亡，也可能是nanos2表达水平下调导致的生殖母细胞的分化大于增殖，后续的实验表明了后者的正确性。 二 Nanos2的功能 nanos2在胚胎时期启动雄性发育程序 在胚胎发育早期原始生殖细胞PGC并非在真正的性腺位置产生，所以PGC在形成后会在微环境的影响下穿过体细胞进入生殖嵴，即将来发育成性腺的地方。在PGC迁移的过程中这些生殖细胞的性别还没有被确定，它们具有向两性分化的潜能。多数人认为生殖细胞周围的体细胞对生殖细胞起着性别决定的作用，而nanos2是一个被发现的起性别决定作用的生殖细胞内源性基因的因子。 PGC定置于生殖嵴后开始性别分化，大约在E10.5天后，雌性生殖细胞进入减数分裂并停留在减数分裂前Ⅰ期，而雄性生殖细胞开始增殖或停留在G1／G0期并伴随基因甲基化和印迹基因表达等。Nanos2在13.5天开始表达，15.5天达到高峰之后迅速下降直至消失。敲除nanos2基因的小鼠不能产生完整的性腺，生殖细胞不断丢失，说明nanos2对生殖细胞的发育是必须的。 通过基因芯片技术检测，nanos2基因敲除的生殖细胞中许多和减数分裂有关的基因转录水平上调，而雄性特异性基因转录水平下调。暗示nanos2可能是通过抑制雌性化而启动雄性分化程序。如果将nanos2在胚胎期一直超表达，超表达的雌鼠在E13.5天生殖细胞的减数分裂被抑制，并且趋向雄