细菌学卫生检验种类及标准绪论.pptVIP

第七章 细菌学卫生检验种类及标准 邵丽军 主要内容 细菌学鉴定方法 1、形态结构检查 2、细菌生长特性检查如菌落 3、生化试验 4、血清学试验 5、药敏试验 6、细菌毒素检测 7、分子生物学检测 8、噬菌体分型试验 9、动物试验 临床标本常规细菌学检验程序 细菌学检验报告原则 分级报告 一级报告：直接涂片染色结果及培养结果 二级报告：分离培养及药敏结果 三级报告：细菌种属、药敏结果、结果评价和建议 一、血液标本细菌学检验 二、脑脊液标本细菌学检验 三、穿刺液和引流液标本细菌学检验 四、尿液标本细菌学检验 五、脓液和分泌物标本细菌学检验 六、痰液标本细菌学检验 七、生殖道标本细菌学检验 八、粪便标本细菌学检验 一、血液标本细菌学检验 （一）血液标本的采集与送检 1. 采样时间：发热期、用药之前、 病情发展 2. 采样部位及频率：多部位、高频率 例1：亚急性心内膜炎：24h内在三个不同部位采集3次血标本，两次间隔不少于15分钟，如培养阴性，就再采3次血标本。 例2：急性脓毒血症：在10分钟内在不同部位采2～3次血标本。 3. 样本采集的量：成人血量5～10ml，婴儿1ml～2ml，儿童3ml～5ml；当怀疑为真菌感染时，应采集双份量，分别作双相培养(37℃/28℃)。 4. 样本的送检：尽快，室温 5. 操作：直接采血注入含増菌肉汤的培养瓶或用不含防腐剂的肝素抗凝管至实验室接种，需同时做需氧和厌氧培养 血培养 （二）细菌学检验 二、脑脊液标本细菌学检验 （一）标本的采集与送检 1. 采样：腰椎穿刺术无菌采集脑脊液3-5ml，床边接种或放入无菌试管中，立即送检（采样到送检不超过1h）； 2.注意保温，不可置冰箱保存，因为会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌； 3、脑脓肿吸出物尚须检测厌氧菌和寄生虫 培养基选择：普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿等。 （二）细菌学检查? 1．涂片检查：革兰染色：查找一般细菌，尤其脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和链球菌多见。抗酸染色：查找结核分枝杆菌。墨汁染色：查找新型隐球菌。 2．细菌培养：脑脊髓液培养多数需3～4天，在此期间如有细菌生长，经鉴定报告“××菌”，同时报告药敏试验结果。 三、穿刺液和引流液标本细菌学检验 （一）标本的采集与送检 1、标本来源：胸腔积液、腹水、心包积液、关节液、胆汁、鞘膜液深部组织液等 2、标本量：心包积液、关节液为1-5ml，胸腔积液、腹水为5-10ml 3、收集送检：无菌收集并置于无菌抗凝试管送检，无法立即送检可冷藏；标本还可床边接种或置厌氧运送培养基内送检，无法立即送检可室温保存。 （二）细菌学检查 1、标本处理：①浆液离心沉淀物涂片；②脓液直接涂片；③含血细胞，加等量蒸馏水破坏红细胞后，离心沉淀物涂片 2、涂片检查：这类标本因原部位是无菌的，只要检出细菌即可诊断感染的类型，故直接涂片很重要。革兰染色：查找一般细菌。抗酸染色：查找结核分枝杆菌。 3、分离培养及鉴定：离心沉淀物分别接种增菌肉汤、血琼脂平板、中国蓝或麦康凯琼脂平板、厌氧血琼脂平板。如有细菌生长，需进一步鉴定和药敏试验后报告。 四、尿液标本细菌学检验 （二）细菌学检查 尿液检查 五、脓液和分泌物标本细菌学检验 （二）细菌学检查 （二）痰液细菌学检查 （二）细菌学检验 1、显微镜检查 2、分离培养及鉴定 3、结果报告 （二）细菌学检验 1、显微镜检查：因正常菌群多，一般不做，特殊菌可做。如霍乱弧菌制动试验和革兰染色镜检；结核分枝杆菌抗酸染色；葡萄球菌、艰难梭菌、弯曲菌和酵母样菌革兰染色 2、? 细菌培养：根据需要检查的细菌选择粪便培养条件，一般需培养2～3天如有阳性菌生长，需进一步进行生化鉴定和药敏试验后报告。 重要知识点 各类临床标本采集及送检 临床标本常规细菌学检验程序及分级报告 （一）标本的采集与送检 1、采样方法 生殖道分泌物 穿刺液标本 怀疑梅毒患者 前列腺液 2、送检 普通细菌、衣原体、支原体 淋病奈瑟球菌 厌氧菌 清洗尿道口外阴，棉拭子深入尿道口2-3cm采集；阴道分泌物在阴窥镜下采集 盆腔脓肿者及子宫分泌物需穿刺采集 清洗生殖器，从溃疡底部挤出少许组织液 按摩前列腺后采集 七、生殖道标本细菌学检验 无法及时送检可冷藏保存 床边接种或保温后及时送检 室温，厌氧送检或床边接种 （一）标本的采集与送检 1、采样方法 1、常规培养不主张用肛拭子，自然排便后，挑取有脓液、粘液部位的粪便2-3g或液状粪便1-2ml； 2、直肠拭子法：不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿，可采用直肠拭子方法采集； 2、送检 不能及时送检放入卡-布运送培养基或pH7.0磷酸盐甘油运送或保存。疑似霍乱弧菌，碱性蛋白