第13章基因表达调控LT.pptVIP

中心法则与操纵子 第 一 节基本概念与原理 第 三 节  原核基因表达调节 第 四 节 真核基因表达调节 真核生物RNA聚合酶Ⅱ转录的基因结构与功能 锌指的N-端部分形成β折叠结构，C-端部分形成α螺旋结构。 每个α螺旋有两处识别特异的DNA序列；3个α螺旋结构与一个DNA双螺旋的深沟（major groove）结合，调控RNA的转录。 3. 亮氨酸拉链（Leu zipper） 亮氨酸拉链是蛋白质二聚体化 蛋白质相互作用的一种方式 的一种结构基础。 某些癌基因 如c-jun，v-jun，c-fos，v-fos等 表达产物通过亮氨酸拉链形成同源或异源二聚体，大大增加对DNA的结合能力，调控基因表达。 在亮氨酸拉链近N-端有富含碱性 带正电荷 氨基酸残基的区域，是DNA的结合区。 其他调 控元件 增强子 或 沉默子 CAAT盒 GC盒 TATA 盒 结构基因 +1 调节基因表达水平 决定基因表达的 时空特异性等。 激素，金属离子， 小分子化合物等 反应元件。 决定基因 表达的基 础水平 与RNA poly II 结合，决定转录 起始点的精确定位 使转录 增强或 减弱 维持基本的表达水平 1. 启动子 真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。 TATA盒 GC盒 CAAT盒 确保转录精确而有效地起始的DNA序列 （一）顺式作用元件 GC盒 TATA 盒 结构基因 +1 决定基因表达的基础水平 与RNA poly II 结合，决定转录起始点的精确定位。 CAAT盒 上游启动子序列（UPS） -25 -35 -70 -80 -110 能增强启动子活性的DNA序列。 特点： 1. 能远距离增强启动子的活性； 2. 在启动子的上游和下游均起作用； 3. 无方向性； 4. 对启动子的影响无严格的专一性。 作用机理：目前已知增强子与蛋白质因子结合后能改变染色质的结构。 含义： 2. 增强子 enhancer 3. 沉默子 silencer 某些基因的负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 （二）反式作用因子 1. 转录调节因子分类（按功能特性） 基本转录因子 general transcription factors 是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA mRNA、tRNA及rRNA 转录的类别。 特异转录因子 special transcription factors 为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。 转录激活因子 转录抑制因子 2. 转录调节因子结构 DNA结合域 转录激活域 TF 蛋白质-蛋白质结合域 （二聚化结构域） 谷氨酰胺富含域 酸性激活域 脯氨酸富含域 最常见的DNA结合域 1. 锌指 zinc finger C —— Cys H —— His 常结合GC盒 Zn Cys His N C 锌指 N C 2. 螺旋-转角-螺旋（helix-turn-helix，HTH） HTH的基本结构含有两个α螺旋, α螺旋之间有一个转角,约有60个氨基酸。 其中一个α螺旋 羧基端 识别特异的顺式作用元件上的DNA序列，另一个α螺旋 氨基端 则结合在DNA上，调控基因的转录。 亮氨酸拉链是一个高亮氨酸组成的α螺旋，每两个螺圈出现一个亮氨酸，形成拉链的一边。 两个蛋白质因子的α螺旋通过亮氨酸的疏水作用结合在一起形成拉链结构 亮氨酸拉链 （三）mRNA 转录激活及其调节 polⅡ TFⅡH TAF TFⅡF TAF TAF TFⅡA TFⅡB TBP 真核RNA聚合酶Ⅱ在转录因子帮助下，形成的转录起始复合物 TATA DNA TBP相关因子 五、RNA Pol II转录终止的调节机制尚不清楚 （一）HIV基因组转录终止调节 （二）热休克蛋白基因的转录终止调节 病毒蛋白Tat与转录产物5′端特异RNA序列结合，并与宿主蛋白质、RNA Pol II相互作用，阻止HIV基因组转录的提早终止。 在应激条件下暂时性停止大多数基因的转录和翻译，启动一套能够提高细胞生存能力的蛋白质即热休克蛋白 heat shock protein 的表达。 六、转录后水平的调节也是基因表达调控的重要环节 （一）hnRNA加工成熟的调节 （二）mRNA运输、胞浆内稳定性的调节 加工过程包括加帽、加尾、剪接、碱基修饰和编辑等。 通过与蛋白质结合形成核蛋白体复合物 ribonucleoprotein, RNP 进行。 ——调节的主要环节在转录起始 一、原核基因转录调节特点 （一）σ因子决定RNA聚合酶识别特异性 （二）操纵子模型的普遍性 （三）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍