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荧光分光光度法 第一节 概 述 某些物质受到光照射时，吸收某种波长的光之后，会发射出比原来吸收波长更长的光，当激发光停止照射，这种光线也随之消失，此种光称为荧光(fluorescence)。 物质吸收光能后所产生的光辐射称之为荧光和磷光单重态和三重态：分子中的电子运动包括电子轨道的运动和电子的自旋运动。 分子中电子的自旋状态可用多重态 2S+1 描述，S为总自旋量子数。 若分子中没有未配对的电子，即S=0,则2S+1=1 称为单重态； 若分子中有两个自旋平行的未配对电子，即S=1，则2S+1=3称为三重态，用T 表示。 通常的情况下分子的电子处于最低的能级状态，用S0 表示。若分子受激发，其电子从基态的电子能级跃迁到较高的电子能级，即激发态，用S1, S2……表示。 RLS 二. 金属螯合物的荧光 三. 荧光的熄灭 紫外-可见分光光度计测量池(吸收池) 荧光分析法的应用 一. 工作曲线法 荧光分析的灵敏度比紫外－可见分光光度法高103～104. 荧光熄灭工作曲线法 Fx F Cs Cx 直接荧光标准曲线法 F Cs Fx Cx 二. 荧光分析法的灵敏度 * Modern Instrument Analytical Method 分子发光的基本原理 第一次记录荧光现象的是16世纪西班牙的内科医生和植物学家N.Monardes，1575年他提到在含有一种称为“Li