实验四胆固醇的测定.docVIP

山东医学高等专科学校《生物化学》实验教案 教研室 生物化学 课程 生物化学实验 专业 2012级临床 指导教师 徐燕 教材 生物化学实验 内容 实验血浆脂类测定——GPO-PAP法测定 学 要 求 教学目的和要 求 1、掌握GOD-PAP法的检测原理。 2、掌握用GOD-PAP法检测的操作步骤。GPO-PAP法测定GPO-PAP法测定 难点：测定原理。 教学媒体 学生动手操作为主，课堂演示为辅 教 学 过 程 复习旧课 总胆固醇测定方法及临床意义 讲 授 新 课 （一）原理 胆固醇酯 + H2O 胆固醇+ 脂肪酸 胆固醇+ O2 胆甾烯酮 + H2O H2O2 + 4-AAP + 酚 醌亚胺 + H2O （二）操作步骤 空白（B） 校准（C） 测定（U） 样 品（μL） -- -- 10 校准液（μL） -- 10 -- D.W. （μL） 10 -- -- 工作液（μL） 1000 1000 1000 混匀，37℃水浴10min，505nm波长，以空白管调0，测定各管吸光度。 （三）结果计算：， 其中 CS 5.2mmol/L （四）注意事项 样品中胆固醇浓度大于13mmol/L时，可用生理盐水稀释后再重新测定，结果乘以稀释倍数。 课堂提问 本法容易受到哪些物质的干扰？ 课堂小节 GPO-PAP法测定GPO-PAP法测定 《生物化学》潘文干主编（第６版）．人民卫生出版社 《基础医学实验指导》自编 胆固醇酯酶 胆固醇氧化酶 过氧化物酶