动物细胞工程第二节课用教程方案.ppt

1．在课本上划出动物细胞与组织培养的概念，用双色笔圈出关键词，尝试进行解读。 2.动物细胞与组织培养的地位： 3.选材和原因： 4.结合图解2-13，圈出关键词 5.培养过程中使用胰蛋白酶的作用： 6.动物细胞与组织培养的主要区别： 7.区分一组名词：原代培养和传代培养、细胞株和细胞系、细胞的接触性抑制现象 8.动物细胞培养过程的具体条件有哪些？ O2和CO2的作用？ 9.培养基的类型及区别 10.合成培养基需添加什么成分，目的是什么？ 11.培养过程中需保证什么条件？必要时可添加什么成分？原因是什么？ 12.比较不同细胞体外培养的难易度。 13．列表比较动物细胞培养和植物组织培养 1.核移植的概念和种类 2.选用去核卵母细胞的原因 3.通过分析“多莉”的产生过程描述核移植的过程 4.“多莉”羊培育中的相关技术及原理 5.“多莉”羊的遗传物质组成 6.体细胞核移植的应用 7.体细胞核移植和克隆的存在问题 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体 一、动物细胞融合 受精作用 动物细胞融合 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 细胞融合与融合诱导细胞融合物质 诱导剂：病毒、聚乙二醇诱导细胞融合的病毒必须灭活。 思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？ 二、单克隆抗体 什么是抗体？ 　　抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 B淋巴细胞产生抗体。 单克隆抗体 　　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 　　特点：特异性强、灵敏度高 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体？ 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 思考： 1、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 　　资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导方法 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 5、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 1.动物细胞工程技术的基础是：（　　　　） 　A．动物细胞融合 　B．胚胎移植 　C．动物细胞培养 　D．核移植 Ｃ ２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（　　） A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同