动物细胞培养和核移植技术(反思修正后的)教程方案.ppt

资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程） 课堂小结 动物体细胞核移植技术和克隆动物 * 专题2 细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 2.2 动物细胞工程 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 动物细胞培养 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞核移植 动物细胞工程常用技术 其它动物细胞工程的基础 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。 一、动物细胞培养 （一）动物细胞培养的过程 结合图2-16，阅读P44最后一段至P46第一段结束。 1、找出关键词并理解它们的含义。 2、叙述动物细胞培养的过程。 细胞贴壁 细胞的接触抑制 原代培养 传代培养 细胞悬液 3、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样 最终培养成新个体？ 不能。 动物细胞培养的结果：使细胞数目增多。 通常取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 因为其分化程度低、增殖能力强，更容易培养。 说明细胞与细胞间的主要物质是蛋白质 1. 动物细胞培养对培养的材料有要求吗？ 3. 用胰蛋白酶处理，组织就会分散成单个细胞，说明了什么？ 2. 为什么在培养前要将组织分散成单个细胞？ 成块的组织不利于培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。 4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。 5.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 保存10代以内的细胞。 因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化， 有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。 强调一：细胞贴壁过程 细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴 附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于帖附。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 强调二：接触抑制 人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 原代培养 强调三：原代培养与传代培养 传代培养 （二）动物细胞培养的概念（P44） 就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 原理：细胞增殖 想一想：动物细胞培养的基本原理是什么？ （三）动物细胞培养条件 能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？ 1、无菌、无毒的环境 对培养液和培养用具进行无菌处理； 在培养液中添加一定量的抗生素; 定期更换培养液； 2、营养 葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等 动物血清、血浆 3、温度和pH 温度36.5±0.5度，pH7.2～7.4 4、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） O2是细胞代谢所必需的。 CO2维持培养液的pH。 （四）动物细胞培养技术的应用 1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等； 3、用于检测有毒物质及毒性； 2、动物基因工程离不开动物细胞的培养； 4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、 药理等方面的研究。 阅读P46-47 获得细胞 或细胞产物 细胞的全能性 细胞数目增多 一般为植物体 培养结果 快速繁殖、培育脱毒作物等 培养目的 葡萄糖、动物血清 促生长因子 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.回忆克隆羊“多莉”的培育过程 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 克隆就是无性繁殖，具体地说，是指 一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。 a.分子水平上： b.细胞水平上： c.个体水平上： 1. 什么是克隆？ 一般指DNA克隆。 指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。 指基因型完全相同的两个或