灵龟八法开穴灸对阳虚模型大鼠外周血IL2CK4CK8影响实验研究.pdfVIP

中文摘要 目的：阳虚证为中医辩证中基本证型之一，也是临床经常见到的证型。 其临床表现主要有面色苍白，四肢厥冷，精神萎靡，性欲低下，腰膝无力， 夜尿频多，小便清长，在女子则可有带下清稀，宫寒不孕或肢肿气短等症 状，在脉象和舌象上可表现为舌淡苔白而润，脉虚弱无力。中医一直都十 分注重人体的阳气，因此从古至今各医家对于其论述也十分之多。随着现 代医学的发展，大量研究表明，阳虚与机体免疫系统功能低下以及紊乱有 着密切的关系。机体免疫功能的实现主要是通过细胞免疫和体液免疫这两 种路径相互协同完成的。在细胞免疫这个路径中T细胞亚群CD4+／CD8+是 具有代表性的指标。体液免疫中细胞因子IL-2水平则是反映机体免疫系 统功能的重要指标。大量资料表明，防治阳虚证的机制，机理与调整 CD4+／CD8+比值及IL-2的水平趋于正常有密切的关系。目前，已有大量关 于运用中医疗法提高机体免疫系统功能调整免疫功能紊乱的文献报道。但 多集中在针刺、方剂等方面，但大量临床观察却显示，灸法对于免疫系统 功能低下或紊乱类疾病具有良好的实际效果，且由于无创伤，痛苦小，易 于操作乐于被广大患者接受且易于推广，具有很大发展潜力。因此，十分 有必要加强进行关于灸法防治阳虚证相关疾病的实验研究。其研究成果将 有助于更好地指导临床实践。本课题通过灸法结合灵龟八法选穴对阳虚模 型大鼠足三里，肾俞，以及运用灵龟八法按时所开之穴进行刺激，观察此 法对阳虚模型大鼠外周血细胞因子IL-2及T淋巴细胞亚群CD4+／CD8+比 值的影响变化，初步探讨灸法对于影响机体免疫系统功能的机制，并为临 床运用灸法防治以免疫系统功能低下或紊乱为主要内在实质特征的阳虚 证提供科学的实验依据和理论指导。 方法：选用sD大鼠每天每只老鼠按照3mg／1 009体重标准行大腿肌肉 注射AHP，连续5天。大鼠出现身体蜷曲、背部拱起、蜷缩在一起、四肢 尾冷、神情疲惫、被毛疏松、反应呆滞、毛色暗淡、身体消瘦、食欲减退、 不耐低温、精神萎靡、毛发脱落等虚损症状。根据中医八纲辩证之阳虚证， 辨证参考标准，模型大鼠所表现出的一系列体征与“阳虚”状态高度一致， 说明此次试验所建立的阳虚大鼠动物模型属成功模型。将建立好的阳虚模 型大鼠按随机数字表随机分组，建立好的阳虚模型大鼠不予干预视为阳性 空白对照组(A组)，足三里、肾俞温和灸组(B组)，灵龟八法开穴灸组(C 组)，灵龟八法开穴灸结合足三里、肾俞温和灸组(D组)，正常大鼠视为 阴性空白对照组(E组)，共5组，每组1 0只，雌雄分养。B、C、D组大鼠 每天每穴温和灸15分钟，左右交替进行，连续2周。灵龟八法开穴法依 据《子午流注与灵龟八法临床应用盘》(魏晋盛主编，山西科学技术出版 社，2 01 o年1 o月，第一版)简易法选穴。A、E组大鼠只抓取，不做治疗。 持续2周后，运用大鼠心脏取血法取各组大鼠新鲜全血2-3ml，充分抗凝 后，送检进行流式细胞术的标本使用全血以检测各种大鼠血液CD4+／CD8+ 比值；送检进行ELISA法检测的标本使用离心血清以检测各组大鼠血液IL 一2水平。运用统计学Lsd—t检验对各组数据进行分析，比较各组阳虚模 型大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4+／CD8+比值和细胞因子IL-2水平变化 方面是否有统计意义上的差异。 结果：本次5组大鼠的外周血细胞因子IL-2数值检测结果表明，足 三里、肾俞温和灸组、灵龟八法开穴灸组、灵龟八法开穴灸结合足三里、 组均能提高外周血细胞因子IL-2的水平。足三里、肾俞温和灸组(B组)， 灵龟八法开穴灸组(C组)与阳性空白对照组(A组)相比，外周血IL-2 水平有所上升(P0．05)。灵龟八法开穴灸结合足三里、肾俞温和灸组与 阳性空白对照组(A组)相比，外周血IL-2水平明显提升(P0．01)。由 此可见，灵龟八法开穴灸、足三里、肾俞温和灸、灵龟八法开穴灸结合足 三里、肾俞温和灸均可提高阳虚大鼠外周血细胞因子IL-2水平，提高阳 虚大鼠免疫力，其中灵龟八法开穴灸结合足三里、肾俞温和灸效果最为显 著。大鼠的T细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+／CD8+数值检测结果表明，足三 里、肾俞温和灸组、灵龟八法开穴灸组、灵龟八法开穴灸结合足三里、肾 俞温和灸组均能显著提高外周血T淋巴细胞免疫功能。在阳虚大鼠T淋 巴细胞亚群CD4+、CD4+／CD8+数值变化影响方面，灵龟八法开穴灸结合足 三里、肾俞温和灸组比前两组(B组、C组)效果更加显著(P0．01)， 使CD4+、CD4+／CDS+数值升高，而使CD8+数值下降。 结论：灵龟八法开穴灸，灵龟八法开穴灸结合足三里、肾俞温和灸， 足三里、肾俞温和灸这三种疗法均能使阳虚模型大鼠外周血CD4+／CD8+比 值、IL-2水平上升。从而大大提高了阳虚证机体的免疫功能，并纠正了免 疫系