7-生长-2.ppt

第四节 环境对微生物生长的影响 谷氨酸发酵过程中，氧、温度、pH和磷酸盐等的调节和控制 ①氧。谷氨酸产生菌是好氧菌，通风和搅拌不仅会影响菌种对氮源和碳源的利用率，而且会影响发酵周期和谷氨酸的合成量。尤其是在发酵后期，加大通气量有利于谷氨酸的合成 ②温度。菌种生长的最适温度为30～32 ℃。当菌体生长到稳定期，适当提高温度有利于产酸，因此，在发酵后期，可将温度提高到34～37 ℃。 ③pH。谷氨酸产生菌发酵的最适pH在7.0～8.0。但在发酵过程中，随着营养物质的利用，代谢产物的积累，培养液的pH会不断变化。如随着氮源的利用，放出氨，pH会上升；当糖被利用生成有机酸时，pH会下降。 ④磷酸盐。它是谷氨酸发酵过程中必需的，但浓度不能过高，否则会转向缬氨酸发酵。发酵结束后，常用离子交换树脂法等进行提取。 防止措施： 1）特殊加热灭菌法 分别灭菌（糖液；磷酸盐等）； 低压灭菌（含糖类等培养基采用115 ℃灭菌15min） 间歇灭菌 2）其他方法 加入0.01％EDTA或0.01％NTA等螯合剂到培养基中，防止金属离子发生沉淀； 用气体灭菌剂如环氧乙烷等对个别成分进行灭菌； 过滤除菌法 第八节 新型抗微生物药物的筛选 本章重点 一、微生物的生长 生长量的测定方法 典型生长曲线（几个时期，特点，对数期3个参数的计算，指数期微生物的应用，如何缩短延滞期？稳定期为何到来？） 了解同步培养的目的和方法。 了解两类连续培养的装置和原理、用途。 二、环境因素对微生物的影响 温度 水活度和渗透压 氧气（分类，酶，氧对厌氧菌毒害的机制） pH（培养过程中培养基pH 变化的原因及如何调节） 辐射（紫外辐射，电离辐射） 三、有害微生物的控制 灭菌、消毒、防腐、化疗的异同，并举例。 常用的灭菌方法（巴氏消毒法，高压蒸汽灭菌法，紫外线，电离辐射） 了解常用的消毒剂和防腐剂的种类及原理，石炭酸系数 抗代谢药物，抗生素 （定义，磺胺的作用原理，常用抗生素的作用机制） 5. 抗药性产生的机制 青霉素β-内酰胺环结构与D-丙氨酸末端结构相似，从而能占据 D-丙氨酸的位置与转肽酶结合，酶无法正常行使其功能，肽链之间无法彼此连接，抑制了细胞壁的合成。 2）干扰蛋白质合成 四环素 ：同核糖体30S小亚基结合，抑制氨基酰-tRNA 结合 于核糖体A位点，从而抑制蛋白质合成。 链霉素、卡那霉素、新霉素： 同核糖体30S小亚基结合，直接抑制蛋白质合成或 引起错译。 红霉素： 同核糖体50S大亚基结合，抑制蛋白质合成中肽链 的延长。 3）抑制核酸合成 原核生物与真核生物核酸的合成机制差别不大，所以，抑制核酸合成的抗生素选择毒力通常不如其他抗生素。 丝裂霉素：阻止解链，抑制DNA复制； 利福霉素：与细菌的依赖DNA的RNA聚合酶结合，阻止 RNA合成； 放线菌素D：抑制RNA转录； 喹诺酮类（合成的，环丙沙星，诺氟沙星，氧氟沙星）： 抑制DNA促旋酶而干扰DNA复制、修复和转录 4）干扰细胞膜 多粘菌素：使细胞膜上的蛋白质释放，细胞内容物外漏。 制霉菌素、两性霉素： 与膜固醇结合，引起细胞成分泄漏, 控制假丝酵母感染。 短杆菌肽：使氧化磷酸化解偶联，细胞内容物外漏。 原核生物与真核生物细胞膜结构差别不大，所以抑制细胞膜合成的抗生素选择毒力通常不如其他抗生素。 （2）半合成抗生素 对天然抗生素的化学结构进行人为改造后的抗生素，称为半合成抗生素。 青霉素易过敏、不稳定、不能口服和易产生耐药菌株。 青霉素结构改造：改造其母核6‐氨基青霉烷酸（6－aminopenicillanic acid,6-APA）的侧链R基团。 6‐APA的制备： 6-APA抑菌力微弱，在发酵液中的含量也较低。一般以苄青霉素为原料，利用大肠杆菌的青霉素酰化酶裂解后制取6-APA。 R基团 将6-APA与各种不同的化学合成侧链酶法催化，就可合成各种相应的半合成青霉素，如氨苄青霉素、羧苄青霉素、羟苄青霉素和氧哌嗪青霉素等。 （3）生物药物素（biopharmaceutin） 自上世纪九十年代以来，从自然界筛选天然抗生素已面临“山穷水尽”的境地，而在筛选新抗生素基础上发展起来的、比抗生素疗效更为广泛的生理活性产物如酶抑制剂、免疫调节剂、受体拮抗剂和抗氧化剂等微生物的其他次级