微生物的代谢调控和代谢工程课件.pptVIP

第八章 微生物的代谢调控与代谢工程 第一节 微生物代谢的自我调节 第二节 微生物的代谢调控 第三节 提高代谢产物产量的方法 第四节 代谢工程 第一节 微生物代谢的自我调节 微生物代谢是受到高度调节的，如下事实可以说明 1）微生物生长在含单一有机化合物为能源的合成培养基中，所有大分子单体（如氨基酸）的合成速率同大分子（如蛋白质）的合成速率协调一致，不会浪费能量去合成那些他们用不着的东西。 2）任何一种单体的合成，如能从外源获得并能进入细胞内，单体的合成自动停止，参与这些单体生成的酶的合成也会停止； 3）微生物只有在有某些有机基质（如乳糖）存在时，才会合成异化这些基质的酶； 4）如存在两种有机基质，微生物会先合成那些能异化更易利用的基质的酶，待易利用的基质耗竭才开始诱导分解较难利用的基质的酶； 5）养分影响生长速率，从而相应改变细胞大分子的组成（如RNA含量） 微生物自我调节的部位： 1、养分吸收分泌的通道 大多数亲水分子难于透过细胞膜，需借助一些负责运输的酶系统（如透酶）才得以实现； 有些是需能的。 2、限制基质与酶的接近 在真核生物中，各种代谢库的基质分别存在于由胞膜分隔的细胞器内，如在链孢霉中精氨酸存在于细胞质和液泡内，这两处参与精氨酸代谢的酶量有很大的差别。 原核生物的控制方式不同，其中有些酶是以多酶复合物或以细胞膜结合的方式存在，类似于酶的固定化形式，使它不能自由活动。 3、代谢途径通量的控制 微生物控制代谢物流的方法有两种： 调节现有酶的量、改变已有酶分子的活性 ? 微生物自我调节的三个部位实际上也就是三个类型，但都涉及到酶促反应调节。 ? 酶促调节的方式包括酶活性调节和酶合成调节两大类 一、酶活性调节 ? ? 二、酶合成的调节 ? 凡是能促进酶合成的调节称为诱导；而能阻碍酶合成的调节称为阻遏。 ? 酶合成的调节是一种通过调节酶的合成量进而调节代谢速率的调节机制，这是一种在基因水平上（在原核生物中主要在转录水平上）的代谢调节。 ? 同调节酶的活性的反馈抑制等相比，通过调节酶的合成而实现代谢调节的方式是一类较间接而缓慢的调节方式；其优点是通过阻止酶的过量合成，有利于节约生物合成的原料和能量。 一）酶合成调节的类型 组成酶 不依赖于酶底物或类似物的存在而合成 如葡萄糖转化为丙酮酸过程中的各种酶 诱导酶 依赖于某种底物或底物的结构类似物的存在而合成 如大肠杆菌乳糖利用酶 1、酶合成的诱导（induction） ? 诱导剂可以是诱导酶的底物，也可是底物的结构类似物 如：乳糖是大肠杆菌?-半乳糖苷酶合成的诱导剂，也是此酶的底物 [实际上乳糖不是真正的诱导物，它必须先转化为别乳糖才能起诱导剂的作用] ? 诱导剂也可以不是该酶的作用底物 如异丙基- ?-D-硫代半乳糖苷（IPTG）是?-半乳糖苷酶合成的极佳诱导剂，但不是作用底物； ? 酶的作用底物不一定有诱导作用 如对硝基苯-?-L-阿拉伯糖苷是?-半乳糖苷酶的底物，但不能诱导该酶的合成。 2、酶合成的阻遏(repression) ?指由某代谢途径末端产物过量积累而引起的阻遏。 末端产物阻遏 (end-product repression) ? 末端产物阻遏在代谢调节中有重要作用，保证细胞内各种物质维持适当的浓度；普遍存在于氨基酸核苷酸生物合成途径中。 分解代谢物阻遏 (catabolite repression) ——是指两种碳源（或氮源）分解底物同时存在时，细胞利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的底物的有关分解酶合成的现象。 or ——当培养基中同时存在有多种可供利用的底物时，某些酶的合成往往被容易利用的底物所阻遏，这就是分解代谢阻遏。 ? 最典型的例子是细胞通过最易利用的碳源（如葡萄糖）的分解产物来抑制一些酶的合成。 ? 这个现象最早在青霉素的生产中发现，可快速利用的葡萄糖致使青霉素产量特别低，而缓慢利用的乳糖却能较好地生产青霉素。 ? 进一步的研究表明，乳糖并不是青霉素合成的特殊前体，它的价值仅在于缓慢利用。被快速利用的葡萄糖的分解产物阻遏了青霉素合成酶的合成。 把大肠杆菌培养在含有葡萄糖和乳糖的培养基中，可明显看到大肠杆菌经历了两个对数期。 葡萄糖在第一个周期中被利用。在葡萄糖代谢初期，?-半乳糖苷酶和半乳糖苷透性酶的合成受阻遏，使乳糖不被利用。 葡萄糖被消耗完后，乳糖代谢所需的酶开始合成，于是出现了利用乳糖的第二个生长周期。 ? 阻遏作用并非快速利用的碳源（或氮源）本身作用的结果；而是其分解代谢过程中所产生的中间代谢物引起； ? 这种抑制青霉素合成及乳糖利用的现象，起初认为只有葡萄糖才会产生，故称为葡萄糖效应。