分子生物学第2章+染色体与dna—2课件.ppt

四、转座作用的遗传学效应 转座最典型作用是引起不稳定的突变等位基因。 转座引起插入突变，插入致基因失活是转座 最直接的效应。 转座产生新的基因 转座产生染色体畸变 转座引起生物进化 补充复习题 1、解释概念：端粒与端粒酶、ＡＰ位点、 同义突变、错义突变、无义突变、 回复突变、抑制突变、中性突变、框移突变、 klenow片段。 2、试述端粒与端粒酶的结构特点与功能。 3、简述尿嘧啶糖苷酶修复系统的修复机制。 4、简述大肠杆菌错配修复系统的修复机制。 5、DNA复制的保真性通过哪些机制实现？ 6、试述原核生物DNA聚合酶Ⅰ和DNA聚合酶Ⅲ 　 的结构特点、生物学活性及在分子生物学研究 　 方面的作用。 * * * 在原核生物中，复制起始通常为一个，而在真核生物 中则为多个。 * 3、碱基丢失的修复： 碱基丢失可产生AP位点： 一方面利用AP内切酶、5′→3′外切酶、 聚合酶和连接酶的修复作用； 另一方面直接利用插入酶补回正确的碱基。 关于碱基插入酶的生物学意义不十分清楚，它 可能为修复AP位点提供了一条更为迅捷的途径， 当AP内切酶基因突变时，这一途径更为重要。 （二）损伤修复 1、光修复——DNA直接修复 光复活修复是一酶促反应过程，催化该反应的 酶称光复活酶。 可见光 FADH2 蝶呤 紫外线 光复活酶 酶DNA复合物 二聚体裂开 酶释放 UV 光修复酶 N N O O CH3 N N O O CH3 R R P N N O O CH3 N N CH3 O O H H R R P 嘧啶二聚体的形成与解聚 2、切除修复 切除修复是一酶促反应过程，主要包括三步反应： ⑴ DNA特异内切酶或糖苷酶识别DNA的损伤部位， 并在损伤位点的5′端切断DNA链，然后在5′→3′ 外切酶的作用下逐步切除损伤的DNA片段。 ⑵ DNA修复聚合酶在缺口处催化DNA合成，使其取 代损伤的DNA片段。 ⑶ 在DNA连接酶的作用下，使新合成的DNA 片段与 原有的DNA片段连接，以恢复DNA原有的结构。 是生物界普遍存在的现象，为哺乳动物DNA损伤 的主要修 复方式。 DNA损伤的 核苷酸切除修复 DNA错配 修复系统 切除修复 碱基切除修复 核苷酸切除修复 糖苷酶 修复系统 复制修复 损伤修复 与紫外线损伤有关的基因包括： uvrA、uvrB、uvrC、uvrD 表达产物为： UvrA、UvrB、UvrC、UvrD。 UvrA具有ATP活性，可识别DNA损伤部位， 使DNA构象改变，有利于UvrB与损伤DNA的结合。 （1）原核生物DNA损伤的核苷酸切除修复： 大肠杆菌的UvrABC切除修复系统最清楚。 UvrA UvrA2 UvrA2UvrB2 UvrA2UvrB2－DNA UvrA2 UvrC进入 UvrB2UvrC2－DNA UvrB在损伤部位3′端切口 UvrC在损伤部位5′端切口 (此双切不同步，3′在5′后) UvrD解旋释 出损伤片段 UvrC DNApolⅠ 填充空隙 连接酶完成修复 (Leu拉链) 损伤修复过程： 可修复切除12-13个核苷酸片段。 E.coli的切除修复方式 DNApolⅠ,dNTP OH P DNA ligase ATP ADP UvrA UvrB UvrC UvrB UvrD 真核生物从酵母到人类，切除修复基因和蛋白 质高度保守，十分相似，但修复过程比原核生物 复杂得多；人类核苷酸切除修复约需30种基因产 物参加。 人类核苷酸切除修复与原核生物的相似点： ① 均是双内切，且不同步。 ② 修复过程均可概括为识：识别损伤部位； 切：切除损伤片段； 补：修复合成DNA； 连：连接切口。 （2）真核生物DNA损伤的核苷酸切除修复： 可修复切除27-29个核苷酸片段。 ①切除损伤DNA链 16种蛋白质 3种蛋白质 ②切除DNA片段大小 27～29个 12～13个 ③ TFⅡH 和复制蛋白