第11章食品中有害污染物的检验研究课件.ppt

在水浴上将溶剂挥干，用少量三氯甲烷溶解残渣并转移到具塞小试管中。取部分溶液加入正己烷、三氟乙酸，将试管塞紧，混匀，静置30min，使AFTB1衍生为AFTB2a，用氮气吹干，加入少量流动相溶解供高效液相色谱测定。 3、测定 将按上述方法处理的衍生和未衍生样品和标准溶液注入高效液相色谱仪分析。 荧光检测器，Ex=360nm,Em=425nm C18色谱柱（250×4mm） 甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钾（1+1） 1.3ml/min 样品用三氟乙酸衍生的目的是确证样品中是否含有AFTB1。 确证样品中是否含有黄曲霉毒素？ 未衍生化的 衍生化的 标准溶液（AFTB1） 标准溶液（AFTB2a） 样品溶液(出峰情况判断，有？无?) 样品溶液衍生化后在此出峰，可判断样品中检出AFTB1 一、四环素类抗生素的残留检验 由放线菌产生的一类广谱抗生素，是家畜、家禽常用的防病治病药物。包括金霉素 (CTC) 、土霉素(OTC) 、四环素（TC）及半合成衍生物。其结构均为十二氢化并四苯基本骨架。 第三节 抗生素残留量 5 7 R5 R7 H Cl 金霉素 OH H 土霉素 H H 四环素 抗生素结构中都含有酸性的酚羟基和烯醇羟基及碱性的二甲氨基，该类药物均为酸碱两性化合物。 5 7 易溶于稀酸和稀碱。 在我国四环素、土霉素和金霉素是允许使用，但有最高残留限量规定。 家禽 高效液相色谱法的检出限： 四环素：0.15mg/kg 土霉素：0.20mg/kg 金霉素：0.65mg/kg HPLC法测定四环素类兽药残留 取一定量切碎的肉样食品，用适量5%高氯酸振荡提取； 将提取液离心后，取上清液经0.45um滤膜过滤； 反相色谱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，工作曲线法定量。 检测波长：355nm； 色谱柱:ODS柱； 流动相：乙腈+0.01mol/L磷酸二氢钠溶液（35+65）（ pH2.5 ），使用前用超声波脱气； 柱温：室温，流速是1.0ml/min. 工作曲线的制作： 取切碎的肉样，分别加入不同浓度的四环素类抗生素标准溶液，按样品前处理方法处理后，进样测定，记录保留时间和峰高。以峰高为纵坐标，以待测物浓度为横坐标，绘制工作曲线。 C mAU 工作曲线 C mAU 工作曲线 标准曲线 C1 C2 使用工作曲线可以保证标准系列和样品处于完全相同的实验条件，避免引入系统误差。 流动相中水相的pH值为2.5，可以改善四环素类抗生素在C18柱上的分离度和峰形。 用5%高氯酸处理样品时，当pH值低于蛋白质等电点时，蛋白质以阳离子形式存在，高氯酸可与蛋白质阳离子形成不溶性盐而沉淀，通过离心除去。 方 法 说 明 第十一章 食品中有害污染物的检验 第一节 概况 一.特点 1.被测定物质含量低 通常以ppm、ppb计 2.样品基底组成复杂，测定干扰多 第一节 有机磷农药残留量的检验一、结构和理化性质结构：磷酸酯 P O O R O X R (S) 有机磷农药多为磷酸酯类或硫代磷酸酯类，其结构式中R1、R2多为甲氧基（CH3O-）或乙氧基（C2H5O-）；Z为氧（O）或硫（S）原子：X为烷氧基、芳氧基或其他取代基团。可以合成多种有机磷化合物。 过去我国生产的有机磷农药绝大多数为杀虫剂，如常用的对硫磷、内吸磷、马拉硫磷、乐果、敌百虫及敌敌畏等，近几年来已先后合成杀菌剂、杀鼠剂等有机磷农药。?? 敌敌畏，dichlorvos，O,O-二甲基-O-（2，2-二氯乙烯基）磷酸酯。 甲拌磷，phorate，O,O-二乙基-S- 乙硫基甲基二硫代磷酸酯 甲基对硫磷（O,O-二甲基-O-对硝基苯基硫代磷酸酯 ） 对硫磷 （O,O-二乙基-O-对硝基苯基硫代磷酸酯 ） 有机磷农药大多呈油状或结晶状，工业品呈淡黄色至棕色，除敌百虫和敌敌畏之外，大多是有蒜臭味。 不溶于水，易溶于有机溶剂如苯、丙酮、乙醚、三氯甲烷及油类，对光、热、氧均较稳定，遇碱易分解破坏，敌百虫例外。所以有机磷农药的提取与净化应在中性或酸性条件下进行。敌百虫为白色结晶，能溶于水，遇碱可转变为毒性较大的敌敌畏。??  GB / T 1 4 5 5 3 -2 0 0 3 粮食、 水果和蔬菜中有机磷农药测定的 气相色谱法 一、气相色谱法 原理：样品经处理（提取、净化和浓缩）后，有机磷农药组分经气相色谱柱分离进入火焰光度检测器，在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式，放射出波长526n