蛋白质的分离纯化-2课件.pptVIP

2.蛋白质的盐溶和盐析 　盐溶（salting-in） ：低浓度的中性盐可以增加蛋白质的溶解度，这种现象称为蛋白质的盐溶现象。 同浓度二价中性盐对蛋白质溶解度的影响比单价中性盐大的多。 　盐析（salting-out） ：当溶液中的离子强度达到一定的数值时（盐浓度高达一定数值时），蛋白质的溶解度开始下降，很多蛋白质可以从水溶液中析出，这种现象称为盐析。 3.有机溶剂分级分离法 与水互溶的有机溶剂（如甲醇、乙醇和丙酮等） 能使蛋白质在水中的溶解度显著降低，在室温下，这些有机溶剂不仅能引起蛋白质沉淀，而且伴随着变性。 　这种沉淀的主要原因是有机溶剂的加入改变了介质的介电常数。 4.改变温度分离蛋白质 0~40oC之间：大部分球状蛋白质的溶解度随温度升高而增加， 例外：0～25oC，人的血红蛋白溶解度随温度上升而降低。 40~50oC以上，大部分蛋白质变得不稳定并开始变性。 一般蛋白质的分级分离操作一般都在0~4oC温度下进行。 （三）根据蛋白质电荷不同的纯化方法 主要方法： 电泳 离子交换层析 电泳概述 　由于蛋白质在指定的PH溶液中所带电荷和分子量不同，形状不同，在电场中泳动速度不同。 　因此根据这一原理就可以从蛋白质混合液中将各种蛋白质分离开来，所以电泳技术已成为分析、分离蛋白质的重要手段之一。 1.聚丙烯酰胺凝胶电泳 (poly