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2013-2014学年高中生物 3.4 酶的固定化课件 中图版选修1
第四节 酶的固定化
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课程标准
1.尝试制备和应用固定化酶。
2.通过实验了解并探讨固定化酶的应用价值。
课标解读
1.说出固定化酶的作用、原理和制备方法。
2.了解木瓜蛋白酶的固定化及其制备过程。
3.说出固定化细胞的作用、原理和方法。探讨固定化酶
和固定化细胞的应用价值。
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(1)概念:通过_____或_____的方法,将_______的酶与_______的载体结合,使酶固定在载体上,并在一定的_________内进行催化反应,这样制成的酶称为固定化酶。
固定化酶和固定化细胞技术
1.固定化酶
物理
化学
水溶性
不溶性
空间范围
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(2)优点:固定化酶_____稳定,可以_____________ 。制品较易_____ ,所需工艺设备_________ 。应用固定化酶,工业生产可以实现_______ 、 _______ 、 _______ ,极大地降低_________ 。
(1)概念:利用适当的_____将_____________固定起来称为细胞固定化技术。
(2)优点:固定化细胞比固定化酶_______ , ___________
___,目前对_____和_______等单细胞的固定已显示出明显的优势。
2.固定化细胞
活性
反复使用多次
纯化
简单易行
大批量
连续化
自动化
生产成本
载体
合成酶的细胞
更简捷
使用寿命更
细菌
酵母菌
长
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日常生活中人们用来蒸馒头的发酵粉在浸泡宜用凉水、温水还是开水?
提示 浸泡发酵粉最好用温水——温度过低,不利于发挥酶活性;温度过高会杀死酵母细胞。
[思维激活1]
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酶的固定化方法大致可以分为以下三类:
(1)包埋法:是指将酶包裹在多孔的载体中,如将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中,或包裹在硝酸纤维素等半透性高分子膜中,如下图C、D。
(2)共价键结合法:是指将酶分子相互结合,或将其结合到纤维素、琼脂糖、离子交换树脂等载体上的固定方式,也叫交联法或化学结合法,如下图B。
(3)物理吸附法:是指将酶吸附到固体吸附剂表面的方法,固体吸附剂多为活性炭、多孔玻璃等,如下图A。
1.固定化酶的方法
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(1)细胞固定化的方法
①包埋法
a.含义:将细胞包埋在多孔载体的内部而制成固定化细胞的方法。
b.凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定化方法,适用于微生物、动物和植物细胞的固定化。所使用的载体主要有琼脂、海藻酸钙凝胶、角叉菜胶、明胶等。
②吸附法
a.动物细胞大多数具有附着特性,能够很好地附着在容器壁、微载体和中空纤维等载体上。
2.固定化细胞的方法与优缺点
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b.将植物细胞吸附在泡沫塑料的大孔隙或裂缝中,或将植物细胞吸附在中空纤维的外壁上。
(2)固定化细胞的优点
①固定化细胞仍能进行正常的生长、繁殖和代谢,可以像游离的细胞一样用于发酵生产。
②固定化细胞技术免去了破碎细胞提取酶等步骤,能充分利用细胞内的酶,因而,固定化细胞内酶的活性基本没有损失。
③保留了细胞内原有的多酶系统,对于多步催化的连续反应优势就更加明显。
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(3)固定化细胞的缺点
①固定化细胞只能用于生产胞外酶和其他能够分泌到细胞外的产物。
②由于载体的影响,使营养物质和产物的扩散受到一定的限制。
③在好氧性发酵中,限制了溶解氧的传递和输送。
④为了维持细胞的正常生命
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