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原料氨基酸,20种 mRNA是合成蛋白质的“蓝图(或模板)” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体作为合成多肽链的装配机(操作台) mRNA是遗传信息的载体(载有遗传密码,genetic code),是合成蛋白质的蓝图(模板),它以一系列三联体密码子(codon)的形式从DNA转录了遗传信息。每个密码子代表一个氨基酸。 mRNA占细胞总RNA的5-10%,不稳定,寿命短。 原核的mRNA 是多顺反子;真核的mRNA 是单顺反子。 遗传密码 遗传密码为三联体(每三个碱基代表一个氨基酸),由5’到3’阅读,无间断。即使在少数重叠基因(如病毒)中,其开放阅读框架(reading frame)仍按此原则。 密码有简并性(degeneracy),即一个氨基酸可由几个密码子表示;通用性,大多数生物使用同样的遗传密码,但也会有所偏爱。 一般起始密码为AUG。UAA,UAG和UGA为终止密码。 原核tRNA有30-40种,真核有50-60种,含70-90个核苷酸, 并有多种稀有碱基。 tRNA是最小的RNA, 占细胞总RNA 的15%左右,其功能是搬运氨基酸和解读密码子。 tRNA 具有“四环一臂”和“三叶草” 形的典型结构。 tRNA的功能是解读mRNA上的密码子和搬运氨基酸 tRNA上至少有4 个位点与多肽链合成有关:即3’CCA氨基酸接受位点、氨基酰-tRNA合成酶识别位点、核糖体识别位点和反密码子位点。 每一个氨基酸有其自身的tRNA。氨基酸的羧基与tRNA的 3’ CCA-OH以酯键结合。 氨基酸与mRNA相应的密码子正确“对号”须依赖于tRNA的反密码子。 密码子与反密码子的配对方式 核糖体是rRNA 与几十种蛋白质的复合体,有大、小两个亚基构成。含有合成蛋白质多肽链所必需的酶、起始因子(IF)、延伸因子(EF)、释放因子(RF)等。 原核的核糖体(70S)= 30S小亚基 + 50S大亚基 其中 30S小亚基含16S rRNA 和21种蛋白质 50S大亚基含23S,5SrRNA和34种蛋白质 真核的核糖体(80S)= 40S小亚基 + 60S大亚基 其中 40S 小亚基含18S rRNA 和33种蛋白质 60S 大亚基含28S,5.8S,5SrRNA和45种蛋白质 核糖体有4个基本功能 1. 容纳mRNA,并能沿着mRNA由5’——3’ 移动,由tRNA解读其密码; 2. 氨基酰位点(A位点),可结合氨基酰-tRNA(AA-tRNA); 3. 肽酰基位点(P位点),可结合肽酰基-tRNA(肽-tRNA); 4. 肽酰基转移酶中心,是形成肽键的位点等。 所有参与合成多肽链的氨基酸都要激活,并由数十种高度专一的氨基酰-tRNA合成酶催化。该酶由两个识别位点,它们能识别特定的氨基酸和选择其所对应的tRNA,使两者连接起来(利用ATP)。 反应如下: 氨基酸的羧基与tRNA 的3’端CCA-OH 以酯键相连,因此其氨基是自由的。 首先IF3、IF1帮助30S小亚基 与mRNA结合,IF2和GTP帮助 甲酰甲硫氨酸-tRNA与AUG配 对,接着IF3脱离,形成30S 起始复合物。50S大亚基进入, IF1和IF2脱离,形成50S起始 复合物,需要GTP。甲酰甲硫 氨酸-tRNA处于P位。 氨基酸进位,肽链形成和延伸,核糖体沿着mRNA的5’——3’ 方向移位,循环往复,新合成的肽链由氨基端向着羧基端不断延长,直至mRNA上出现终止密码,相应的肽链释放因子RF1(对应UAA、UAG),RF2(对应UAA、UGA)占据A位。肽链的合成终止,并从核糖体上释放。 核糖体大、小亚基解聚,并进入下一轮合成。 * * 第15章 蛋白质翻译 Protein Biosynthesis (Translation) 本章主要内容: 翻译系统 蛋白质生物合成的过程 多肽链翻译
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