第八章蛋白质的生物合成——翻译8解析.ppt

第一节 蛋白质合成的分子基础 一、蛋白质生物合成的模板 二、tRNA 三、密码子与反密码子的相互作用 四、核糖体 从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 ●遗传密码的特点 1 连续性(commaless) 编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读，密码间既无间断也无交叉。  3 通用性(universal) 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。 已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 4 摆动性(wobble)变偶性 转运氨基酸的tRNA的反密码需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码反向配对结合，但反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律，称为摆动配对。 5 方向性 即解读方向为5′→ 3′ 二、tRNA ● tRNA与氨基酸的活化 ●tRNA的三级结构示意图 ●密码子、反密码子配对的摆动现象 四、核糖体 ●核糖体是多肽链合成的装置或场所 核糖体(核蛋白体)的组成 大肠杆菌核蛋白体的空间结构为一椭圆球体，其30S亚基呈哑铃状，50S亚基带有三角，中间凹陷形成空穴，将30S小亚基抱住，两亚基的结合面为蛋白质生物合成的场所。 ☆小亚基：可与mRNA、GTP和起动tRNA结合。 ☆大亚基： 具有两个不同的tRNA结合点。 A位—受位或氨酰基位，可与新进入的氨基酰tRNA结合 P位—给位或肽酰基位，可与延伸中的肽酰基tRNA结合 具有转肽酶活性：将给位上的肽酰基转移给受位上的氨基酰tRNA，形成肽键。 具有GTPase活性，水解GTP，获得能量。 具有起动因子、延长因子及释放因子的结合部位。 课堂讨论: 1 分子生物学的知识具我们远吗? 说明理由或举例 2 分子生物学课程的开设有意义吗?说明理由或举例 3 能说说上课没精神的原因吗?什么课能使你有兴趣? 4 你能提出几点改变课堂教学状况的合理化建议吗? 5 如果你是一名教师,你想怎么开展教学? tRNA与酶结合的模型 氨基酰-tRNA合成酶特点: 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 活化一个氨基酸消耗2个高能键 ●氨基酰-tRNA的表示方法 ●起始肽链合成的氨基酰-tRNA表示方法 tRNAiMet：起始者tRNA (initiator-tRNA) tRNAeMet：肽链延长中携带Met的tRNA tRNAifMet：起始者tRNA携带N-甲酰甲硫氨酸（fMet） tRNAefMet：肽链延长中携带Met的tRNA 30S起动复合物的形成：在起动因子的促进下，30S小亚基与mRNA的起动部位，起动tRNA（fmet-tRNAfmet），和GTP结合，形成复合体。 70S起动前复合体的形成：IF3从30S起动复合体上脱落，50S大亚基与复合体结合，形成70S起动前复合体。 70S起动复合体的形成：GTP被水解，IF1和IF2从复合物上脱落。此时，tRNAfmet的反密码UAC与mRNA上的起动密码AUG互补结合，tRNAfmet结合在核蛋白的给位（P位）。 ● SD序列 在起始密码子AUG上游9-13个核苷酸处，有一段可与核糖体16S rRNA配对结合的、富含嘌呤的3-9个核苷酸的共同序列，一般为AGGA，此序列称SD序列。它与核糖体小亚基内16S rRNA的3’端一段富含嘧啶的序列 GAUCACCUCCUUA-OH（称反SD序列）互补，形成氢键。使得结合于30S亚基上的起始tRNA能正确地定位于mRNA的起始密码子AUG。 ●真核生物翻译起始复合物形成 真核生物翻译的起始 起始因子eIF3结合到核糖体（80S）的小亚基（40S）上，使大亚基（60S）与小亚基解离 甲硫酰tRNA（ Met-tRNAimet ）结合 mRNA结合（需帽结合蛋白CBP） 真核生物翻译起始复合物形成 二、翻译的延伸 ●原核生物肽链合成的延长因子 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 核蛋白体沿mRNA链滑动，不断使多肽链延长，直到终止信号进入A位。