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实验六 中性粒细胞的吞噬作用 临床微免教研室 实验目的 1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。 2.通过本实验理解机体的非特异性免疫机制。 实验原理 血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞,通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤,能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重要组成部分。 实验材料 1.白色葡萄球菌8h培养物 2.抗凝人血(肝素抗凝管)、瑞氏染液、蒸馏水 3.试管、玻片、采血针、酒精棉球、吸管、滴管、显微镜、香柏油 试验步骤 1.白色葡萄球菌培养物的准备 2.采血(2滴) 3.加菌液(用微量加样器取准备好的菌液40ul加入肝素抗凝血试管内,轻轻混匀) 4.37℃温育30min 5.推片 6.瑞氏染色 7.镜检 油镜检查:寻找中性粒细胞,如果染 色结果正确,可见细胞核 及被吞噬的细菌染成紫色, 而粒细胞的细胞浆则为淡红色。 8.计数 吞噬百分率:观察200个中性粒细胞,计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数,计算出吞噬细胞百分率。 200个中性粒细胞中吞噬细菌的细胞数数 200 X100% 参考值:61.4%-64.2% 8.计数 吞噬指数:观察200个中性粒细胞,计算其中被吞噬的细菌总数,平均每个中性粒细胞吞噬的细菌数即为吞噬指数。 吞噬指数= 200个中性粒细胞中吞噬的细菌总数 200 参考值:1.01-1.11
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