基因工程、细胞工程、胚胎工程流程图课件.ppt

某种生物 （所有或部分DNA) 限制酶 多个DNA片段 多个重组DNA 受体菌的不同个体 分别导入 DNA连接酶 载体 群体（基因组或部分基因文库） （不同个体含不同DNA片段） （同种限制酶切割） 1.从基因组文库中提取目的基因 目的基因的制备： PCR技术 DNA复制 过程 DNA变性（90～95℃）→退火（复性55~60℃）→子链延伸（70~75℃）→重复循环 DNA复制起始，RNA引物形成→DNA片段生成→RNA引物水解→完整的DNA分子形成 相同点 原则 碱基互补配对 条件 模板、原料（dCTP、dATP、dGTP、dTTP）、能量、酶、引物等 不同点 解旋方式 氢键在高温下断裂，双链全部解开 解旋酶催化氢键逐步断裂 场所 体外 主要在细胞核中 引物 DNA RNA 酶 热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶等 结果 在短时间内形成大量的DNA片段 形成完整的DNA分子 2.利用PCR技术扩增目的基因 (1)反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。 目的基因的mRNA 杂交双链 (单链RNA/单链DNA) 单链DNA 反转录酶 DNA聚合酶 双链DNA (目的基因) 3、人工合成目的基因（DNA合成仪） 已知核苷酸序列，且基因较小，也可通过D