实验动物眼底照相及荧光素眼底血管造影概述.pptxVIP

实验动物眼底照相及荧光素眼底血管造影 昭衍（苏州）新药研究中心 眼科实验室 -------眼科基础知识 可获取眼底彩照及FFA的仪器 台式裂隙灯+前置镜 台式眼底照相机 手持式眼底照相机 动物眼底结构-猴 视网膜颞上动脉 视网膜颞上静脉 视网膜鼻上动脉 视网膜鼻上静脉 视网膜鼻下动脉 视网膜颞下动脉 视网膜颞下静脉 黄斑中心凹 黄斑反光晕轮 视盘 食蟹猴眼底图谱 手持式眼底照相 数据来源：昭衍（苏州）新药研究中心 数据来源：昭衍（苏州）新药研究中心 动物眼底结构-猴 正常眼底图 A：神经纤维反光 B：豹纹状眼底 C：豹纹状眼底 A C B 视盘 视网膜静脉 视网膜动脉 动物眼底结构-兔 新西兰兔眼底图谱 兔：视盘位于上方，主要动静脉从视盘中央进入眼内分为内侧支和鼻侧支，动脉位于表层，静脉位于深层，动静脉平行或彼此交叉。 脉络膜血管 手持式眼底照相加+60D前置镜 手持式眼底照相 动物眼底结构-狗 黄绿色透明毯层 深色素层 鼻下支动脉 鼻下支静脉脉 上支静脉 上支动脉 颞下支动静脉 Beagle犬眼底图谱 视盘 视网膜静脉 视网膜动脉 鼠：视盘位于视网膜中央，色淡红，无明显黄斑结构，视网膜血管为全血管型，中央动脉与中央静脉相间排列。 动物眼底结构-鼠 SD大鼠眼底图谱 BN大鼠眼底图谱 视盘 视网膜静脉 视网膜动脉 脉络膜血管 数据来源：昭衍（苏州）新药研究中心 A A：视网膜色素紊乱、色素上皮萎缩紊乱 B：视网膜色素紊乱 C:黄斑中心凹颞侧见2个黄白色病灶，未见明显出血。 B C 眼底异常图片 荧光素眼底血管造影 一、原理： 荧光素眼底血管造影（fundus fluorescenin angiography, FFA）最基本的原理是利用能发荧光的物质，用特定波长的光线激发，产生可以观察到得图像，激发停止，荧光就消失。 FFA采用的荧光染料是荧光素钠，造影时将其快速注入静脉内， 用蓝色光照射，使眼底血管内的荧光素钠被激发出荧光，用高速照相及或摄像机进行拍摄或录像，了解实时的眼底情况。 荧光素眼底血管造影 栅滤光片 激发滤光片 眼 光源 照相机 闪光灯 465—490nm 500—530nm 荧光素眼底血管造影 荧光素眼底血管造影 关于荧光素钠 1.荧光素钠药理 荧光素钠（sodium fluorescein）：分子量为376.27，pH=8时荧光最强。 激发光波长在紫蓝色波段（465—490nm），激发发出的荧光波长在黄绿色波段（500—530nm） 分布：60%--80%的荧光素钠在血液中与白蛋白结合不能发出荧光，大约20%游离在血液中可被蓝光激发出荧光。静脉注射后1min，荧光素钠即散布全身组织。 排泄：24h内经肝、肾排出。注射后2—4h皮肤显黄色，2天内尿液呈黄色。多饮水可加速荧光素钠排出。 2.荧光素钠的应用 荧光素钠一般经静脉注射，少数情况可口服给药。(目前我们使用的是10%荧光素钠，0.08ml/kg） 3.荧光素钠的副作用 二、荧光造影眼底血管造影技术操作 1.造影前准备 确认仪器能正常使用 动物的精神状态（特别是进行过） 医疗垃圾袋、生理盐水，开睑器 2.造影过程 过敏试验：目前试验中动物未进行过敏试验。 造影：先拍摄彩色眼底像，应尽量包括全部眼底，突出病变部位。注射荧光素钠，食蟹猴一般使用10%荧光素钠，0.08ml/kg。注射完毕开始计时并开始拍片，前30s连续拍片，每秒1-2张，30s后可每5秒一张。如果双眼病变需要双眼同时造影。 造影早期尽量多照一些图像，中晚期一边观察一边拍摄，注意细节。 荧光素眼底血管造影 三、眼底荧光造影所见的正常荧光形态 内界膜 ILM 神经纤维层 NFL 神经节细胞层 GCL 内丛状层 IPL 内颗粒层 INL 外丛状层 OPL 外颗粒层 ONL 外界膜 OLM 感光细胞层 IS/OS 色素上皮层 RPE 视网膜分层 荧光素眼底血管造影 眼底组织的屏障功能 血-视网膜屏障：血管内皮细胞紧密连接+壁内周细胞组成屏障，其他血管没有此屏蔽功能。 脉络膜—视网膜屏障：RPE间闭锁小带 荧光素眼底血管造影 臂-视网膜循环时间（arm-retina circulation time，A-RCT） 荧光素： 肘中静脉→右心→肺循环→主动脉→颈总动脉→颈内动脉→眼动脉→眼底 A-RCT大体在10～15s 影响A-RCT的各种因素 注射部位、速度、注射处的血管粗细、血液粘度与速度、心脏的排血功能，血管管径和阻力，燃料浓度与剂量。 甲亢和贫血可使染料加速到眼底而红细胞增多症和心排量减低等反之。 颈动脉狭窄等 荧光素