分子生物学电子教案第九章详解.doc

第九章 分子生物学研究方法 ? 1．课程教学内容 (1)核酸技术1—基本操作 (2)核酸技术2—克隆技术 (3)核酸技术3—测序 (4)基因表达和表达分析基因定点诱变 (5)蛋白质与核酸的相互作用 (6)其他（热点）技术 2．课程重点、难点 基因克隆技术、杂交技术、测序技术、蛋白质与核酸的相互作用检测技术 3．课程教学要求 掌握基因克隆技术、杂交技术、测序技术、蛋白质与核酸的相互作用检测等各种技术的原理。 ? 本章内容 ?????????? 核酸的凝胶电泳 ?????????? DNA分子的酶切割 ?????????? 核酸的分子杂交 ?????????? 基因扩增 ?????????? 基因的克隆和表达 ?????????? 细菌的转化 ?????????? DNA核苷酸序列分析 ?????????? 蛋白质的分离与纯化 ?????????? 研究DNA与蛋白质相互作用的方法 一、?? 基本原理：当一种分子被放置在电场当中时，它们会以一定的速度移向适当的电极。 电泳的迁移率：电泳分子在电场作用下的迁移速度，它同电场的强度和电泳分子本身所携带的净电荷成正比。 由于在电泳中使用了一种无反应活性的稳定的支持介质，如琼脂糖和丙烯酰胺，从而降低了对流运动，故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比。 在生理条件下，核酸分子的糖-磷酸骨架中