动物细胞培养和核移植技术上课理科详解.pptVIP

* * 专题2 细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 2.2 动物细胞工程 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 一. 动物细胞培养 1.概念: 从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2.原理：细胞增殖 （有丝分裂） 。 3.过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 单个细胞 加培养液 胰蛋白酶 剪碎 为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？ 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖，也不利于细胞营养物质的吸收和代谢废物的排出。 幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？ 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。 胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质 动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体。高度分化的动物细胞的全能性受到抑制。 不能，因为两者的最适pH不同。 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 原代培养 胰蛋白酶 剪碎 原代培养： 取材（动物组织） →细胞分散→初次培养 传代培养： 培养的细胞→细胞分散→继续培养 进行传代培养的原因： 接触抑制 1.细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 动物细胞生长特性 2.接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。 50代以后 失去接触抑制 接触抑制 部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 原代培养 胰蛋白酶 剪碎 细胞株 细胞系 遗传物质未改变 遗传物质已改变 传代培养中，第10代细胞与第50代以后细胞的主要区别是什么？ 细胞癌变,失去接触抑制特性。 a、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） b、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。） c、温度和PH 36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。 d、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 补充合成培养基中缺乏的物质 ？ 4. 动物细胞培养条件 O2是细胞代谢所必需的。 CO2维持培养液的pH。 获得细胞 或细胞产物 细胞的全能性 细胞数目增多 一般为植物体 培养结果 快速繁殖、培育脱毒作物等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 5.动物细胞培养技术的应用 a、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等； c、用于检测有毒物质及毒性； b、动物基因工程离不开动物细胞的培养； d、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、 药理等方面的研究。 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 这些技术的理论基础是什么？ 植物组织培养 和植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 动物细胞全能性如何？怎样将动物细胞的全能性表达? 利用动物体细胞核移植技术 二. 动物核移植： 1.概念：将动物的一个细胞的 ，移入一个已经去掉细胞核的 中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。 细胞核 卵母细胞 动物核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 （ MⅡ卵母细胞） 减数第二次分裂中期 克隆高产奶牛的培育过程。 将供体细胞注入去核卵母细胞 核移植 胚胎移植 供体细胞培养 供体细胞（供核） 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质） 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 构建重组胚胎 胚