动物细胞融合与单克隆抗体(讲课)详解.pptVIP

植物体细胞杂交过程示意图 灭活病毒诱导动物细胞融合的过程 单克隆抗体的制备 5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤　　 C.①②③④ 　 D.②③ * * * * * * 2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。 “太空婚礼” 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 (1) (1) (2) (3) (4) 温故知新: A细胞 B细胞 融合 一 动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 动物细胞融合过程示意图 细胞膜的流动性 融合 原理 电激、PEG等 诱导融合的手段？ 融合后形成的细胞类型？ AB杂交细胞遗传物质有什么特点？ 三种 AA自融细胞、BB自融细胞、AB杂交细胞 同时具有两种生物的遗传物质 A细胞 B细胞 使细胞相互凝聚 细胞膜打开， 促进细胞发生融合 获得杂交 细胞 除应用植物 细胞杂交手 段外，还有 灭活病毒 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 细胞膜的 流动性 动物细 胞融合 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 细胞膜的 流动性 细胞的全能性 植物体 细胞杂交 用途 诱导融合 手段 融合 方法 融合 原理 比较项目 二、比较 植物细胞杂交技术 动物细胞融合 三、动物细胞融合技术的优势 已成功的动物细胞融合实例有很多，如人—小鼠、人—兔、人—鸡、鼠—兔、鸡—鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌—鸡 、人—胡萝卜 等细胞的融合。 1. 抗体由何种细胞产生？ 2.抗体主要分布在哪里？ 4. 用传统的方法如何获得抗体？ 传统方法生产抗体 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 缺点： 产量低、纯度低，特异性差 怎么获得大量的单一抗体？ 怎么获得大量的单一抗体？ 方案一 利用动物细胞培养技术培养单个效应B细胞，使它增殖，产生出大量的单一抗体 设计方案： 方案二 利用效应B细胞和肿瘤细胞融合， 获得杂交瘤细胞，使它增殖，产生出大量单一抗体 骨髓瘤细胞 免疫小鼠 单克隆抗体 筛选 克隆、筛选 体内培养 体外培养 效应B淋巴细胞 （选择培养基） （抗体检测） 细胞融合 杂交瘤细胞 能产生所需抗体的杂交瘤细胞 看书上53页图，分组讨论，单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） 　 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 A 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ） 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 操作步骤基本相同 D. 都能形成杂种细胞 D 3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（ ） A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D 4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（ 　 ） A．PEG　　 B．灭活的病毒 　 C．电刺激 D．离心 B C