色谱分析法实验实验一填充柱气相色谱进样技术练习一、实验目的1.docVIP

色谱分析法实验实验一填充柱气相色谱进样技术练习一、实验目的1 色谱分析法实验 实验一 填充柱气相色谱进样技术练习 一、实验目的 1、熟悉填充柱色谱仪进样系统结构。 2、掌握微量注射器的使用方法。 3、练习进样技术。 二、仪器与试剂 1、仪器 气相色谱仪一台，上海分析仪器厂。 2、试剂 甲乙酮、环已烷、苯，均为色谱纯或优级纯。 三、实验步骤 1、色谱条件 柱2 mX3mm不锈钢柱，载体：硅烷化白 色载体(60—80目)固定液，DNP，配比：20：100， 柱温90℃，捡测器温度了90℃，气化室温度：130℃， 氢火焰离子化检测器。 2．操作： (1) 调整仪器，使其正常运行 (2) 用1μl注射器分别取0.1μl三种纯物质，多次进样， 观察同一物质相同进样量情况下色谱峰重现性。 (3) 将三种物质按一定比例混合，制成混合样，用10μl 注射器进样0.2μl ，多次进样观察每次进样时色谱 峰重现情况。 四、问题讨论 1、为什么有时同一样品同一进样量时色谱峰形(如峰高)不 同? 2．为什么有时进样后不出峰? 五、注意事项 1、一取好样后应立即进样，进样时整个动作应稳当、连贯、 迅速。 2、硅橡胶密封垫圈在几十次进样后容易漏气，需及时更换。 实验二 有关色谱参数的测试及计算 一、目的要求 1、通过本实验基本色谱参数的测试与计算，定量地了解溶 质组分在色谱柱过程中热力学和动力学作用的量度。 2．理解各色谱参数的意义及其相互关系。 3、通过本实验进一步掌握柱效、柱选择性、分离能力、 保留值等性质，使之能选择出最佳色谱操作条件，得到 可靠的定性，定量结果。 二、基本原理 在规定的色谱条件下，测定惰性组分的死时间(tM)及被 测组分的．保留时间(tR)、半高峰宽(wh/2)及峰宽(w)等参 数，便可计算出基本色谱参数值。 三、仪器与试剂 1 仪器 气相色谱仪一套，色谱柱2000mmX3mm一支， FID检测器；微量注射器(5—10μl)一支。 2 试剂 甲烷(自制)，正己烷，正庚烷，正辛烷，乙酸正 丁酯，102白色载体(60—80目)；Apienzon—L； 石油醚(低沸程馏分)；DNP，乙醚，二氯甲烷。 四、实验步骤 1．联结好仪器系统，检查并排除故障至正常工作状态。 2．制备填充色谱柱： (1)Apienzon-L柱：经计算称取适量102白色硅烷化载 体(60–- 80目)和ApienzonlL油酯(以5%重量比计)，用 CH2Cl2将其溶解并均匀地涂渍在载体上，挥发溶剂至 干。负压装柱至均匀满口，按老化程序老化好待用。 (2)DNP柱：以15%重量比计算称取DNP足量，用 乙醚溶解，均匀涂渍在102白色硅烷化载体上，挥发 溶剂至于，装柱，老化待用。 3．色谱条件 Tj＝120℃，Tc＝100℃，Td＝120℃； 载气：N2流速30m1／min，H2流速40ml／min，空 气流速350m1／min记录仪灵敏度10mV／25cm, 纸速10mm／min；甲烷,乙酸正丁酯+n-C06n-C07+n-C08 混合样4μ1，信号衰减视灵敏度状况而定。 4．测试 待仪器开启运行至基线平稳后，取自制纯净CH4 样品10μ1注入GC仪器系统(如信号过截则可以适当减 少进样量)，计时，准确记录保留时间(tM)。重复进样5－ 10次，至tM值绝大多数重复为止。取其平均值，为本实 验的tM值[tM (甲烷)]。再取四种混合组分的样品溶液4μl 注入仪器系统，得到较理想谱图后，再重复进样3－ 5 次，取其平均保留时间为本实验各组分的保留时间[tR (乙 酸正丁脂)，tR (正已烷)、tR (正庚烷)、tR (正辛烷)]。 5．测试结果 在仪器操作条件稳定无误的情况下，应得到 分离状况良好的色谱图。 五、数据处理 1、记录甲烷的tR值和四组分混合样的各保留值(平均值)。令 tn-1=tR(正己烷); tn=tR(正庚烷);tn+1=tR (正辛烷);ti=tR (乙 酸正丁酯)。 2．按g—4940—85色谱术语标准测量并记录各组分的半高 峰宽Wh/2和峰宽W值。 3．各基本参数计算： (1)调整保留时间：以t R = tR －tM关系计算出tn-1、 tn 、 tn+1 及ti； (2)相对保留值(ri,s)：按ri