三倍体培养和应用分析报告.pptVIP

植物三倍体培养和胚抢救 1. 三倍体培养的意义 三倍体具有生长快、产量高、抗性强、营养高； 高度不育。 适合获取最大营养生长为目的或是获得不育性状为目标，且无性繁殖的植物。 三倍体的培养 巨大型月见草、欧洲山杨三倍体 自然界三倍体发生的频率是很低的（两种情况） 人工诱导 人工诱导三倍体方法 生物学方法：胚乳培养、体细胞杂交 物理学方法：温度激变（温度休克法）、机械损伤、电离辐射、水静压法、高盐高碱法 化学方法 二倍体与四倍体的杂交 胚乳培养 胚乳：二个极核和一个雄配子融合 建立三倍体新类型、产生无籽果实、利用营养体的生长优势； 形态发生学研究和生物合成和代谢的理想实验系统。 历史回顾 1933年，Lampe和Mills就进行了胚乳培养的最初尝试； 1949年，LaRue首次报道了由玉米成熟胚建立起能不断生长的愈伤组织，但未分化器官； 1965年，Johri和Bhojwani在柏外果中发现由培养的成熟胚直接分化出三倍体茎芽 1973年，Srivastava首次由罗氏核实木的成熟胚培养中，获得三倍体胚乳再生植株 胚乳培养 材料的选择：确定适宜的发育时期、严格区分胚乳和其他组织 胚乳的培养：合适的培养基、合理使用植物激素、注意光、温度、pH等因素 愈伤组织的诱导 植株的分化： 器官发生途径：茎芽，诱导生根（激素种类） 胚胎发生途径 诱导胚乳苗生根的方法 当苗长到2-5cm高时， 切除其基部的愈伤组织； 或是将苗直接置于无激素或含有一定浓度生长素的培养基中； 或是基部先用较高浓度的IBA溶液（50-100mg /L）浸泡一定时间以后； 再插入无激素培养基中，经过2-3周，即可生长出不定根。 胚胎发生途径 柑桔的胚乳培养 培养基中的激素水平：2,4-D对胚状体的发生有明显的诱导作用，但对胚状体的发育和萌发有明显的抑制作用；GA3对胚状体的发育和成苗有重要作用 西番莲胚乳愈伤组织诱导 种子 去皮 常规灭菌 剥取胚乳 切成小块 MS＋BA＋NAA培养基 诱导愈伤组织 接种不同BA＋NAA的培养基上诱导不定芽 诱导生根 移栽 倍性检测 染色体倍性变异 胚乳愈伤组织和再生植株的染色体数目常常发生变化，同一植株往往是不同倍性细胞的嵌合体。 可能原因： 胚乳的类型； 胚乳愈伤组织发生的部位； 培养基中外源激素的种类和水平； 继代培养的时间的长短。 体细胞杂交 原生质体的融合 获得三倍体的亲本－四倍体 化学方法 利用一些物质可以阻止有丝分裂，从而产生三倍体或四倍体。 常用：细胞松弛素B、秋水仙素 细胞松弛素B：阻止细胞分裂 秋水仙素：特异性地与细胞中的微管蛋白分子结合 秋水仙素 针对处在有丝分裂中期的细胞，阻止形成纺锤丝，对染色体结构没有显著的影响； 当浓度合适时，对细胞的毒害也不大。 秋水仙素 考虑因素：适宜温度、溶液的最适浓度和处理时间。 方法：浸渍法、摘下法、涂布法、注射法 四倍体与二倍体的杂交 以四倍体和二倍体作为亲本； 两亲本选择性不高时，一般以四倍体作为母本，得到较多的三倍体杂种； 果树及其他不需要其结籽的植物，三倍体的不育性是有利性状 三倍体植株的育种 应用和育种 多倍体较二倍体有较好的经济性状 新型农业食品资源：无籽西瓜、柑桔 高品质树木栽培：毛白杨 无籽西瓜 以二倍体为父本，由四倍体母本上产生的是三倍体的种子。再由二倍体品种作为授粉植株供应花粉给三倍体植株，就可以诱发孤雌生殖而产生无籽西瓜 制种繁琐，种子昂贵 应用组培快繁技术进行组培苗工厂化规模生产、无性系的快速繁育 柑 桔 三倍体柑桔果大、无籽、丰产性好 通过体细胞杂交获得异源四倍体体细胞作为培育三倍体柑桔的亲本 三倍体胚易早期退化 毛 白 杨 极度匮乏的森林资源，生长周期长的老树种制约着中国造纸业的发展。 中国造纸原料的93%是污染严重的草浆，木浆只占3%。 中国工程院院士、北京林业大学教授朱之悌耗15年心血，默默培育出新品种“三倍体毛白杨” 毛 白 杨 毛新杨和染色体加倍的毛白杨花粉杂交育成 生长速度快，蓄积量大、材质白度高、纤维长、木质素含量低和纤维素含量高，是优良的制浆造纸用材 抗叶锈病、褐斑病 嫁接、根繁、扦插、组培育苗 应 用 食用香蕉 葡萄 棉花 糖菾菜 菠萝 苹果 2. 胚抢救技术 胚抢救是对由于营养或生理原因，造成难以播种成苗，或是在发育早期阶段就败育或退化的胚，进行早期离体培养。 应 用 1）早熟、无籽育种 有些早熟果树品种，由于果实发育期短，种胚往往难以成熟，难以直接播种获得组培苗。 无籽葡萄经济价值高，但葡萄无籽的原因大多是合子胚的早期败育，早熟品种尤其如此。无籽品种Y