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专题二 微生物的培养和应用
A.一个平板,统计的菌落数是230 B.两个平板,统计的菌落数是220和260,取平均值240 C.三个平板,统计的菌落数分别是210、50和520,取平均值260 D.四个平板,统计的菌落数分别是210、300、240和250,取平均值250 (1)接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌,常用的灭菌方法是_______ _。培养基中加入化合物A的目的是筛选__________。 (2)实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是________。 (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量__________。 (4)转为固体培养时,为获得单菌落进行继续筛选,常采用平板划线法或______________法,接种后,应将培养皿______(填“正放”或“倒置”)。 高压蒸汽灭菌法 目的菌 异养需氧型 减少 增加 稀释涂布平板 倒置 灭菌 D 否。水葫芦会造成外来物种的入侵 含 义 作 用 来 源 水 优良的溶剂 培养基、大气、代谢产物 碳源 能够提供碳元素的物质 构成生物体的物质;异养生物的能源物质 含碳有机物和含碳无机物 氮源 能够提供氮元素的物质 合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物 含氮无机物和含氮有机物 生长 因子 生物生长不可缺少的微量有机物 酶和核酸的成分 维生素、氨基酸、碱基等 无机 盐 为微生物生长提供C、H、O以外的各种重要元素 细胞内的组成成分,生理调节物质,酶的激活剂等 培养基及大气 * 形状、大小、隆起程度和颜色 强化审答·规范解题 集训真题·体验高考 练出高分 专题二 考点一 微生物的培养与计数 考点二 微生物的分离 考点一 微生物的培养与计数 温度 温度 特殊营养物质如生长因子:微生物生长必需,而自身不能合成的化合物,如:维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等。 (3)种类:按功能分为 种类 制备方法 原理 用途 举例 选择 培养基 加入某些特殊的化学物质 依据微生物对某些物质的依赖性或抗性而设计 从多种微生物中分离出所需微生物 加入青霉素杀死细菌,进而分离得到酵母菌和霉菌等 鉴别 培养基 加入某种指示剂或化学药品 依据指示剂或化学药品产生特定颜色或其他变化 从多种微生物中鉴别出某些种类的微生物 用刚果红培养基鉴别分解纤维素的微生物 (3)种类:按化学组成分为合成培养基和天然培养基 注意 (1)并不是所有培养基的营养成分都相同。 ①自养微生物能够利用空气中的CO2合成有机物,培养基中不需加入有机碳源(可加入无机碳源)。 ②固氮微生物能够固定空气中的N2,合成氨态氮,培养基中不需添加氮源。 (2)培养基中不同的营养成分可以由同一物质提供,有些物质,如NH4HCO3,既是氮源也是某些自养生物的碳源。 (4)消毒与灭菌 条 件 结 果 常用方法 应用范围 消毒 较为温和 的物理或 化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂 消毒法 用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源 灭菌 强烈的 理化因素 杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子) 灼烧灭菌法 接种工具 干热灭菌法 玻璃器皿、金属工具 高压蒸汽 灭菌法 培养基及相关容器 3.大肠杆菌纯化培养 计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 根据配方比例 准确称取各成分 玻棒不断搅拌,防止琼脂糊底导致烧杯破裂 培养基(高压蒸汽灭菌)、培养皿(干热灭菌) 见教材P17 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 倒平板技术 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度? 答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么? 答:凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入凝结水珠培养基,造成污染。 答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。 (2)纯化大肠杆菌 Ⅰ、平板划线法 原理: 最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。 操作流程 灼烧接种环 冷却 划线 (第一区域) 蘸取菌液 灼烧接种环 冷却 划线
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