气相,液相,紫外等分离分析法导论.ppt

第14章 分离分析法导论 1、主要仪器 450 - GC 气相色谱仪( 美国瓦里安公司) 配脉冲火焰光度检测器( PFPD) 、Galaxie 化学工作站；HY - 3 多功能振荡器( 江苏省荣华公司) ；旋转蒸发仪( BUCHI) ；CleanertPC/NH2固相萃取柱( SPE 柱，美国Agela) 。 3、标准曲线的绘制 4、样品测定 第14章 分离分析法导论 2. 按操作形式分类 （1）柱色谱 　　填充柱色谱、毛细管柱色谱。 （2）纸色谱 （3）薄层色谱 3. 按分离原理分类 （1）吸附色谱 （2）分配色谱 （3）离子交换色谱 （4）凝胶色谱 　　征求导师意见，以今后论文试验中可能用到的一种分析方法的应用为题写一篇综述性文章。 　　题目格式　　“……分析方法在（……）中的应用” 色谱保留值（时间） 保留时间（ t R ）：组分从进样到出现峰最大值所需的时间。 死时间（t 0）：不能被固定相滞留的组分从进样到出现峰最大值所需的时间，如气相色谱的空气峰的出峰时间。 调整保留时间（ t‘R ）：扣除死时间后的保留时间，体现了待测组分真实的用于固定相溶解或吸附所需的时间，作为定性指标 较 t R 更合理。 色谱保留值（体积） 保留体积（ VR ）：组分从进样到出现峰最大值所需流动相的体积， VR = tR·F 。 死体积（V0）：不能被固定相滞留的组分从进样到出现峰最大值时所消耗流动相的体积，V0 = t0·F（柱后出口处流动相的体积流速，mL/min）。 调整保留体积（V‘R ）：扣除死体积后的保留体积。 保留体积（ VR ） 死体积（V0） 调整保留体积（V‘R ） 保留时间（ t R ） 死时间（t 0） 调整保留时间（t‘R ） 在相同操作条件下，组分2（或 i）与参比组分1（或 s）的调整保留值之比。仅与柱温、固定相性质有关，为较理想的定性指标。 色谱保留值（相对保留值） 相对保留值（γ2.1 或γi.s ） 1. 塔板理论 14.3 色谱分析的基本理论 2. 速率理论－范第姆特方程 3. 柱效能与流速的关系 4. 色谱分离效能的衡量 1. 塔板理论 理论塔板数是色谱的柱效参数之一，用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效），理论塔板数与柱长成正比，柱越长，理论塔板数越大。 将整个色谱柱比拟为一座分馏塔，将色谱的分离过程比拟为分馏过程。 2. 速率理论－范第姆特方程 3 柱效能与流速的关系 4. 色谱分离效能的衡量 （2）分离度与柱效能、选择性的关系 一、色谱定性方法 1. 与标样对照的方法 2. 利用保留指数法定性 3. 与其他方法结合定性 1. 与标样对照的方法 比较标样和试样的保留值：相同色谱条件下，如果保留值相同，则可能是同一种物质。 　在组分性质和范围较确定、色谱条件非常稳定的情况下，此法很适用。 局限性：单纯依靠 tR 值来判断是否为同一种物质，证据还不够充分；并不是每一种组分都能得到色谱纯的标样。 　采用相对保留值 γi.s 定性，可排除柱长、固定液含量、流动相流速等条件影响，仅与柱温有关，其定性的可靠性较保留值定性大。 　如果样品中组分较多，各峰距离较近，不易精确比较t R和γi.s ，可在样品中加入标样后混合进样，对比混合前后的谱图，如某色谱峰明显增高，则样品中含有此标样成分。 　双柱法可进一步验证已得到的初步结果：分别在极性不同的两根柱子或多根柱子上进行，如仍能观察到保留值相同的现象，则进一步证实此两者为同一种物质。　 　 2. 利用保留指数法定性 　　采用一系列物质作为定性的参照。 特点：保留指数计算精确，准确度高，只要在相同的柱温和固定相条件下进行色谱操作，即可利用文献资料上的保留指数值进行对照来定性。 用正构烷烃系列为基准，规定正构烷烃的保留指数为100Z(Z为碳原子数)，正戊烷、正己烷、正庚烷的保留指数分别为500、600、700，待测物的保留指数为 I 。 3. 与其他方法结合定性 　　目前采用得更多的是与色谱与质谱、红外光谱等联用来进行结构测定。 　　质谱、光谱等精密仪器所起作用与色谱检测器的作用类似，色谱充分发挥分离的特长，质谱或光谱则充分发挥定结构的特长。 1. 较正因子和相对较正因子 二、色谱定量分析 2. 定量方法 （1）归一化法 （2）内标法 （3）外标法 1. 较正因子和相对较正因子 （1）归一化法 　前提：试样中的各组分都能流出色谱柱，且都有相应的色谱峰。 　优点：简便、准确，对操作条件（如进样量、温度、流速等的控制要求不苛刻）。 　局限性：在试样组分不能全部出峰时，不能使用此法。 　将所有的出峰组分的含量之和按100％计算的定量方法。 （2）内标法 　　测量内标物与待测物的峰面积的相对值，操作