第2章 紫外可见光谱.ppt

5. 信号处理与显示装置 光电管输出的信号很弱，经过放大后才能以某种方式将测量结果显示出来。信号处理包括一些数学运算。显示器可由电表、数字显示、荧光屏显示、结果打印、曲线扫描等。显示方式有T、A，有的还可以转换成浓度，ε等。 二、紫外可见分光光度计 分光光度计分为单波长和双波长仪器。 1. 单波长分光光度计 单光束 双光束（空间分隔） 双光束（时间分隔） 特点： 因光束几乎同时通过样品池和参比池，因此可消除光源不稳产生的误差。 光源 检测器 单色器 单色器 切光器 吸收池 双波长分光光度计示意图 2. 双波长分光度计 通过切光器使两束不同波长的光交替通过吸收池，测得吸光度差?A。 ?SB1和?SB2分别为在?1和?2处的背景吸收，当?1和?2 相近时，背景吸收近似相等。二式相减，得 这表明，试样溶液浓度与两个波长处的吸光光差成正比。 特点：可测多组份试样、混浊试样、而且可作成导数光谱、不需参比液（消除了由于参比池的不同和制备空白溶液等产生的误差）、克服了电源不稳而产生的误差，灵敏度高。 * 第六节 分光光度法的定性和定量分析 吸收曲线、?max和?max，不同的化合物可能有相同的?max，但不可能?max和?max完全相同，测?max，通常配高、中、低三种浓度，在?max处测A，计算?max，求平均值。 光谱定性，有一定的局限性，主要是分辨率不高，在得到相同的吸收光谱时，应考虑并非同一物质的可能性，而两种纯化合物的吸收光谱有明显差别时，可肯定两化合物不同。 二、定量方法 （一）单组分定量 1. 标准曲线法 A c Ax cx 标准曲线 校准曲线、线性范围和测定限 校准曲线也称校正曲线，是表示被测物质浓度或量与测定仪器响应信号值之间的定量关系曲线，包括工作曲线和标准曲线。 校正曲线的绘制 线性回归，即用最小二乘法求回归方程 使用校正曲线时需注意： 至少5个点，一般5～10个点，并且应至少一个数量级范围。 纵坐标上的最小刻度应与响应值的实际有效数字相适应。 尽量使曲线的效率接近1。 每次测定样品时应同时绘制标准曲线。 2. 标准比较法 该法是标准曲线法的简化，即只配制一个浓度为cs的标准溶液，并测量其吸光度，求出吸收系数k，然后由Ax=kcx求出cx 该法只有在测定浓度范围内遵守L-B定律，且cx与cs大致相当时，才可得到准确结果。 （二）多组分定量方法 由于吸光度具有加合性，因此可以在同一试样中测定多个组份。 设试样中有两组份 a 和 b，将其显色后，分别绘制吸收曲线，会出现如图所示的三种情况： 1. 解方程组 2. 双波长法—等吸收点法 测定b组分时，选择b组分的最大吸收波长作测定波长?1，由b的峰顶向横坐标作垂线与a吸收曲线的一侧相交，从相交点作横坐标的平行线与a吸收曲线的另一侧相交，交点所对应的波长为参比波长?2 。在?1和?2处分别测量吸光度 与 ，然后相减求 。 在两波长处 a 组分的吸光度相等 ，b组分的吸光度差值 与b组分的浓度呈正比。测组分 a 时，可用相同的方法选择 b组分具有等吸收的两个波长，消去 b 的干扰，测定 a 组分的浓度。 第四节 光的吸收定律 一、朗伯-比尔（Lambert-Beer ）定律 1. 透光度和吸光度 当一束单色光通过溶液时，一部分被吸收，一部分透过溶液，一部分被容器表面反射。 设入射光强度为I0，吸收光强度为Ia，透射光强度为It，反射光强度为Ir，则 在分光光度分析中，通常将待测溶液和参比溶液分别置于同样材料和厚度的容器中，让强度为I0的单色光分别通过两个容器，再测量透射光强度。这样，反射光的强度基本相同，其影响可以互相抵消，则 当一束单色光通过溶液后，由于吸收了一部分光能，光的强度就会减弱。当光透过浓度为c，液层厚度为b 的溶液时，由于一部分光被吸收，因此 随着溶液浓度和液层厚度的增加，光被吸收的程度增加，透射光的强度减小。透射光强度与入射光强度之比称为透光度（transmittance）或透光率，用T表示： 例如，入射光的强度为100，透射光的强度为35，则T = 0.35或35%。 溶液的透光率愈大，表示它对光的吸收程度愈小；相反，透光率愈小，对光的吸收程度愈大。 实践证明，溶液对光的吸收程度与溶液浓度、液层厚度及入射光波长等因素有关。如果保持入射光不变，则溶液对光的吸收程度只与溶液浓度和液层厚度有关，即 为了方便起见： 吸光度（absorban