植物组织特异性启动子的研究进展(精选).docVIP

植物组织特异性启动子的研究进展 摘要：组织特异性启动子也称器官特异性启动子(organ specific promoter)，可调控基因只在某些特定的部位或器官中表达，并往往表现出发育调节的特性。本文介绍了植物组织特异性启动子中的花、果实、种子及叶特异性启动子，并对植物组织特异性启动子研究中问题进行了讨论和展望。 关键词：植物组织特异性启动子，研究进展 启动子(promoter)是RNA聚合酶能够识别并与之结合从而起始基因转录的DNA序列，是重要的顺式作用元件，位于结构基因5’端上游区的DNA序列，能指导全酶与模版的正确结合，活化RNA聚合酶，并使之具有起始特异性转录的形式，决定转录的方向和效率以及所使用的RNA聚合酶类型，是转录调控的中心。目前，植物基因工程中常用的启动子为组成型表达启动子(Constitutive promoter)。组织特异性启动子也称器官特异性启动子(organ specific promoter)，可调控基因只在某些特定的部位或器官中表达，并往往表现出发育调节的特性。外源基因在细胞中表达是基因工程研究的关键，而组织特异性启动子不仅能使目的基因的表达产物在一定器官或组织部位积累，增加区域表达量，同时也可以避免植物营养的不必要浪费。因此，组织特异性启动子一直都是植物基因工程中研究的重点和难点，研究者在植物的分生组织、维管束组织、薄壁组织、花粉、种子和胚乳等几乎各种组织中都发现有组织特异性驱动基因表达的启动子[1]，尤其在根、维管束和韧皮部特异表达启动子研究中取得了很大进展。 1 植物生殖器官表达的组织特异性启动子 1.1 花特异启动子 高等植物发育过程中花器官的形成是一个十分复杂的过程，它包括一系列器官分化及严格控制的细胞及生化变化，同时伴随大量基因的协同表达。植物花特异表达启动子只在植物开花的时期启动基因的表达，它的分离克隆为花卉的品质改良提供了重要的顺式调控元件。 人们克隆了许多花药特异表达的基因，如在花药绒毡层特异表达的TA29[2]和A9[3]以及在花粉壁特异表达的Bp4A[4]基因等，这些基因都是在花药营养细胞 中表达，与生殖细胞的分化无关。Mariani等将烟草花药绒毡层特异表达基因启动子TA29分别与核酸酶Bamase和RnaseTl基因融合后转化植物，这两种核酸酶基因在花药中特异表达，破坏绒毡层，获得雄性不育烟草和油菜[5,6]，开创了基因工程创造雄性不育系的先河，至今已在烟草[7]、油菜[8]等植物上获得成功。还有在花药中特异表达的基因，如拟南芥和油菜的APG 基因等。在花粉中特异表达的基因如：玉米的 Zm13 (蛋白酶抑制剂)、CDPK （钙依赖型蛋白激酶）、番茄的LAT52、LAT 59及油菜Bp4 、I3 、E2和 F2s等。 近年来人们相继分离和鉴定了许多花特异表达基因的启动子，如矮牵牛和金鱼草的类黄酮合成相关的一些基因(CHSA、CHSJ、CHIB、CHIA2)的启动子。其中对查尔酮合成酶(chalcone synthase，CHS)基因家族的查尔酮合酶基因启动子的研究较为深入，CHs是类黄酮类物质生物合成途径中的关键酶，它催化3个分子的丙酚辅酶A(malonyl CoA)与1个分子的香豆酰辅酶A(eoumaryl CoA)生成4,5,7-三羟基黄烷酮(narigen-inchalcone)。类黄酮类物质是广泛存在于高等植物中的次生代谢物，与植物的花色形成密切相关，并在植物与环境的相互作用中起重要作用，如防止紫外损伤、抗病、影响豆科植物的根瘤形成等[9]。 2 果实和种子特异启动子 特异性启动子调控基因表达，不仅可提高基因在这些部位的表达量，而且可有目的地提高转基因植物果实或种子的品质。 目前已获得的果实特异型启动子主要有E8、2A11、2A12、PG、MCP I、B33和ACC氧化酶启动子等。毛自朝等用PCR方法获得了番茄果实专一性启动子2A12和农杆菌C58 Ti质粒上的ipt基因，经农杆菌介导转入番茄品种“中蔬4号”的基因组中。Betaglucuronidase(GUS，β-葡糖苷酸酶)组织化学活性分析表明：2A12启动子具有严格的果实表达专一性；转基因果实中细胞分裂素的含量增加，最终导致果实中种子发育的停滞和胎座组织的增厚，并形成无籽番茄果实；果实采后的储藏保鲜时间延长1-2周[10]。如Krasnyanski 等[11]将E8启动子与报道基因 uidA相连，导入番茄中，在T0、T1代植株果实和叶子中分析β-葡糖醛酸糖苷酶，发现E8控制的uidA基因只在番茄果实里表达。Obiadalla-Ali等采用反义RNA技术，将B33启动子控制的马铃薯果糖-1，6-磷酸酶基因转入番茄中，使其在果实中特异性表达。结果表明，番茄叶绿体中果糖-1，6-磷酸酶活性被抑制，完全成熟的果实的