1第一章4蛋白质化学.pptVIP

肽键的特点： 共价键，具有共轭性 原子共处于一个平面（肽平面，酰胺平面） 肽平面：由组成肽键的四个原子能及相临的两个Cα组成的平面 具有百分之40双键的性质，旋转构象受到限制 以反式结构出现 二、蛋白质的一级结构 （重点） AA在多肽链中的排列顺序。最小单位为氨基酸。 具体内容： ①AA的顺序（成键方式，氨基酸种类，氨基酸数目） ②肽链的数量级 ③二硫键的数量，位置 二硫键(disulfide bonds) 肽链中相应部位上的两个半胱氨酸残基脱氢连接而成，是连接肽链内和肽链间的主要桥键。 在蛋白质分子中起着稳定肽链空间结构的作用，与生物活性有关。 一般数目越多，蛋白质结构越稳定。 生物体内起保护作用的角、皮、毛发的蛋白质中二硫键最多。 三、蛋白质的空间结构 （重点）　　 蛋白质的空间结构通常称为蛋白质的构象（高级结构），是指蛋白质分子中所有原子在三维空间的排列分布和肽键的走向。 空间结构是一级结构为基础的。 二级结构 多肽链的主链在空间螺旋，折叠而成 氢键在链内或链间作用，导致二级结构出现α-螺旋 β-折叠 β- 转角，自由加转 (五)超二级结构(supersecondary structure) 与结构域(structural domain)(过渡态) 超二级结构：在球状蛋白质中，由相邻的二级结构单元组合，相互作用，形成有规则的αα,ββ，αβα，βββ，βαβ，空间上可辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件。 结构域：在超二级结构基础一进一步螺旋，折叠，组装成几个相对独立的三维实体。近似球状的结构，只具有部分生物功能。 结构域与功能域的关系： 对于小分子多肽链pro结构域即为三级结构(功能域) 对于大分子多肽pro通常几个结构域构成三级结构 蛋白质的三级结构： 定义：多肽链上的所有原子在三维空间的分布， 球状pro 具亲水性 在二级基础上，侧链间的作用 　　　　 作用力：次级键（弱键）， 主要有盐键、疏水键、氢键、范德华力 蛋白质的四级结构： 指两条或多条肽链以特殊方式结合成为有生物活性的蛋白质。 两条多肽链以上的pro具有四级结构，肽链之间在空间上相互作用（非共同键）形成的称为寡聚蛋白。 该种肽链就称为该蛋白质的亚基。 四、蛋白质分子中的共价键与次级键 （重点） 共价键（一级结构）：肽键、二硫键 次级键（高级结构）：氢键、疏水键、盐键、范德华力 一级结构化学键：肽键（键内共价键），二硫键（链间共价键）——桥键 二级结构化学键：氢键 三级结构化学键：氢键，疏水键，盐键，范德华力 四级结构化学键：范德华力，盐键 第五节 蛋白质的性质 一 、蛋白质的分子大小 （了解掌握） 二 、蛋白质的两性离解和电泳现象 （重点） 三 、蛋白质的胶体性质（了解掌握） 四 、蛋白质的沉淀作用（重点） 五 、蛋白质的变性（重点） 六 、蛋白质的紫外吸收（了解掌握） 七 、蛋白质的颜色反应（了解掌握） 一 、蛋白质的分子大小 （了解掌握） 蛋白质的分子量 104-106……107 分子量的测定方法： 1．沉降渗析法（超离心法） 2．凝胶过滤法 3．SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法 4．质谱法 5. 渗透压法 分子量测定方法： 1．沉降渗析法（超离心法60000-80000转/分）：根据pro颗粒的沉降系数S，扩散系数D ，R：气体常数，T：绝对温度，V：溶质特异性体积， ρ ：溶剂密度 　M=RST/[D(1-Vρ)] 2．凝胶过滤法：计算收集到的洗脱液的体积。 V=k + clogM 3．SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法：pro在电泳中的迁移速率。 d=k + clogM 4．质谱法：利用高能带电粒子将pro从一金属支持物上释放出来 5. 渗透压法： M=cRT/Π 6. 光散射法：M=τ/Hc 二 、蛋白质的两性离解和电泳现象 （重点） 蛋白质的等电点 定义：当溶液在一定pH值的环境中，使蛋白质所带的正电荷与负电荷恰好相等，即总净电荷为零，在电场中，蛋白质分子既不向阳极移动，也不向阴极移动，此时溶液的pH值称为蛋白质的等电点。 pI与分子中的酸碱性氨基酸的比例有关。 在等电点时，蛋白质的溶解度最小，其它性质如粘度、渗透压及膨胀性等也都是最小。 没有相同电荷相互排斥的影响，因此最不稳定，溶解度最小。 极易借静电引力结合成较大的聚合体，沉淀析出。 电泳：蛋白质颗粒在电场的移动现象 移动速率，方向与蛋白质颗粒的带电性，电荷数 量，颗粒大小有关 应用于pro制备，分离，纯化 自由临界电泳：蛋白质溶解于缓冲液中通电。 区带电泳：蛋白质溶液点在浸了缓冲液的支持物上进行电泳，不同组分形成带状区域。 凝胶电泳：以凝胶（淀粉、琼脂、聚丙烯酰胺）作为支持物的电泳。 纸上电泳：以滤纸作为支