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血清肌酐(Cr或Cre)的测定

血清肌酐(Cr或Cre)的测定 余留海 2013.12.03 血清肌酐(Cr或Cre)的测定 (不去蛋白终点法) Reagent for Creatinine Test 一、原理 二、测定方法 三、参考值 四、临床意义 五、注意事项 六、方法学评价 七、小结 一、原理 肌酐是肌酸代谢的最终产物,由肾脏排出。人体内的肌酸,一部分来自食物、一部分来自体内合成。体内合成肌酐的原料为甘氨酸、精氨酸和蛋氨酸。样品中肌酐与碱性苦味酸作用,生成橙红色的苦味酸肌酐复合物,其颜色强度与样品中肌酐含量正比,与经过同样处理的肌酐校准液进行比较,即可计算出样品中肌酐的含量。根据肌酐与苦味酸反应生成橙红色苦味酸肌酐复合物的速度与假肌酐不同,而设置适宜的检测时间。在20 ~ 80s之间,肌酐反应占绝对优势,80s后其他多数干扰物才有较快的反应,故而选择25 ~ 60s的反应速率来反映真肌酐的含量。而对假肌酐显色的干扰,可以通过选择真肌酐的最大吸收峰(波长)的确定来进行有效的规避。 二、测定步骤: 1、加样: 各管分别混匀, 置37℃恒温10分钟,510nm波长,以空白管调零,在10分钟内完成各管吸光度的测定。 2、计算 计算公式: 样品Cr含量(mmol/L)= ×Cs 注:肌酐校准液浓度 122μmol/L 三、参考值 男性:44.2 ~ 132.6μmol/L 女性:71.1 ~ 106.1μmol/L 四、临床意义 血液肌酐经肾小球过滤,肾小管既不重吸收,也不分泌,即肾对肌酐的排泄能力强,因而肾疾病早期血浆肌酐通常不高,在反映肾小球滤过率下降方面,血肌酐比血尿素的灵敏度低。但血肌酐受饮食、运动、激素、蛋白质代谢等因素的影响较少,所以诊断特异性比血尿素好。 1.增高 血肌酐增高: 由于肾脏储备和代偿能力很强,故早期或轻度肾小球滤过功能受损时,血肌酐正常。只有当肾小球滤过功能降至正常人1/3时,血肌酐才明显增高,故不能反映早期肾功能受损,对晚期肾病临床意义较大。与BUN同时测定意义更大,二者同时升高,说明肾功能严重受损,当Cr>200μmol/L,提示病情继续恶化,有发展为尿毒症的趋势;当Cr>400μmol/L则预后较差。如仅BUN升高,而Cr正常,则可能为肾外因素引起,如消化道出血或尿路梗阻。 2、降低 血肌酐减少,主要见于进行性肌肉萎缩、贫血、白血病等。 五、注意事项 1、必须严格控制反应时间,以尽量避 免快速或慢反应假肌酐物质的干 扰。 2、本方法不宜用血浆标本。 3、溶血产生的红细胞内非特异性物质 将干扰反应,应作血清空白 (0.1ml血清+生理盐水1.00ml)。 六、方法学评价 1、线 性范 围:0.6 ~ 500μmol/L 2、精 密 度:批内CV≤8.3%、批间极 差≤10.2% 3、准 确 度:≥90% 4、空白吸光度:空白管在510nm波长 处,10mm光径下,以蒸馏水调零, 吸光度值≤0.150。 小结 谢谢! * * 样 品 0.10 — — 校准液 — 0.10 — 蒸馏水 — — 0.10 工作液 1.00 1.00 1.00 试剂(ml) 测定(u1 ) 校准(S) 空白(B)

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