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- 约 14页
- 2016-08-20 发布于湖北
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干旱胁迫对玉米幼苗生理生化指标的影响
XXX,云南 昆明 呈贡 650500
摘要 对植物产生伤害的环境称为逆境,又称胁迫。常见的逆境有寒冷、干旱、高温、盐渍等。逆境会伤害植物,严重时会导致植物死亡。逆境对植物的伤害主要表现在细胞脱水、膜系统受破坏,酶活性受影响,从而导致细胞代谢紊乱。植物在长期的适应过程中形成了各种各样抵抗或适应逆境的本领,称为抗性。在生理上,以形成胁迫蛋白、增加渗透调节物质(如脯氨酸含量)、提高保护酶活性等方式提高细胞对各种逆境的抵抗能力。干旱、盐碱和低温是强烈限制作物产量的三大非生物因素,其中干旱造成 的损失最大, 其损失超过其他逆境造成损失的总和。本实验以玉米幼苗为材料,设置对照组(未经过干旱处理),探究了干旱胁迫下脯氨酸(pro)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、H2O2的含量变化以及抗氧化酶(POD、PPO)活性的变化。实验通过分光光度计分别在不同的波长中测出吸光率,间接计算出其含量及酶活性,进而通过对正常条件下的和逆境胁迫下一定量玉米苗体内以上各种物质含量的对比,从而了解玉米体内生理生化指标发生的变化。结果表明:在干旱胁迫下,脯氨酸(pro)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、H2O2的含量相对于对照组均有较明显的上升趋势,POD和PPO活性也表现出较大水平的提高。也说明了玉米苗在干旱条件下既有对植物抗旱不利的物质增加,也有增强抗旱性和保水性的物质的含量增加以维持植物的生命力。
关键词 玉米苗,干旱胁迫,抗逆性,紫外分光光度计吸光率,抗氧化酶
引言
干旱是自然界常见的逆境胁迫因素,干旱也是植物最容易受到的胁迫之一。干旱不仅制约植物的生长生理与产量的高低,也会引起植被结构与功能的空间变化。因此,植物对干旱胁迫的适应及机制一直是植物逆境适应策略研究的一个热点。植物对干旱胁迫的适应过程和受伤害程度与干旱胁迫的强度以及植物自身的抗性联系紧密,并从生理代谢、生理功能、形态适应、生长发育以及生物生产力等多种形式表现出来。土壤有效水分状况与植物之间的关系也是植物生理生态学研究领域的热点问题。大多数植物在短期或轻度土壤缺水情况下叶片水势下降,气孔关闭。限制CO2 摄取和光合作用速率,长期严重干旱条件下可限制植物生长,引起形态结构发生变化(如萎焉,枯黄、干瘪等)。甚至导致植物死亡。
研究表明,游离的脯氨酸在植物细胞抵抗非生物胁迫过程中扮演着越来越重要的角色,许多新的生理功能也逐渐被发现,近几年来有关脯氨酸的研究倍受科学工作者的关注。脯氨酸作为水溶性最大的氮基酸,具有较强水合能力,是理想的渗透介质。作物遇旱时它的大量积累有助于细胞或组织保水,防止脱水,维系生命,故可视为作物对干早环境的一种保护性适应。已经有科学家证明了在逆境条件下脯氨酸的积累用来抵抗植物对非生物胁迫的伤害,植物体内的抗氧化酶系统也能将伤害细胞的活性氧控制在可适应水平内,通过各种过氧化酶的协同作用,可以把细胞内产生的具有很强氧化活性的活性氧如氧负离子、H2O2等直接或间接地清除,防止了活性氧放大耦联作用,保证了细胞内生命活动的正常进行。丙二醛(MDA)和可溶性糖是由于植物器官衰老或在逆境条件下受伤害,其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的,对干旱也具有抵抗作用。GSH是体内重要的抗氧化剂和自由基清除剂1.1 玉米种子发芽率及生理生化指标的测定的材料培养和处理
品种为晴3或鲁玉13的玉米种子(购于西山种子公司)→ 用0.1% HgCl2消毒10 min后 → 用蒸馏水漂洗干净 → 用蒸馏水于26℃下吸涨12 h → 播于垫有6层湿润滤纸的带盖白磁盘(24cm×16cm)中 → 于26℃下暗萌发60 h →计算发芽率(注意与前面结果比较) → 选取长势一致的玉米幼苗做干旱、高温、盐渍或低温下处理(去除较矮或较高的玉米幼苗)。
1.2 试剂和仪器
主要试剂:
0.1% HgCl2 ,TTC,3%磺基水杨酸(SSA),冰乙酸,茚三酮,PBS(pH=7.8) ,0.6%TBA(用0.6% TCA配制),PBS (pH=6.8,内含1mMHA),0.1%Ti(SO4)2[用20%(v/v) H2SO4配制],PBS, (pH=5.8,内含0.1mmol/ LEDTA, 1%PVP), POD反应混合液(10 mmol/L愈创木酚,5 mmol/L H2O2,用PBS溶解),PPO反应混合液(20 mmol/L邻苯二酚,用PBS溶解)5%三氯乙酸,PBS (pH=7.7) ,4 mM DTNB (用0.1M pH=6.8PBS现配)。主要仪器:分光光度仪,离心机,试管,微量加样器,研钵等。
2、方法
2.1 种子发芽率的测定:
所采用的种子发芽率的测定方法是曙红染色法和TTC染色法。凡是有生命活力的种子胚部,在呼吸作用过程中都有氧化还原反应
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