* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 塔板理论的作用与不足 作用:1.塔板理论方程式描述色谱流出曲线应该是正态分布函数,与实际记录的色谱流出曲线相符合,对色谱分配系统有指导意义。 2.理论塔板数公式:n评价色谱柱是成功的。 3.塔板理论提出了塔板高度对色谱峰区域宽度扩张的影响。 不足:1.模拟假设条件提出,同实际情况有差异,所以色谱分配定量关系不准确。 2.塔板理论不能解释H与色谱峰扩张关系。 3.忽略了纵向扩散的作用。 4.流速差异所造成不同的塔板数。 热力学理论 假设条件:1.组分很快在两相中达到分配平衡(板高H) 2.载气通过层析柱不是连续前进,而是间歇式的,每次进气是一个板体积。 3.样品都是加在0号塔板上,纵向扩散忽略不计。 4.分配系数在各塔板上是常数。 * 四 色谱分离原理:速率理论-影响柱效的因素 速率方程(也称范.弟姆特方程式): H = A + B/u + C·u H:理论塔板高度,u:载气的线速度(cm/s) 减小A、B、C三项可提高柱效; 存在着最佳流速; A、B、C三项各与哪些因素有关? * 1. 涡流扩散项-A A = 2λdp dp:固定相的平均颗粒直径 λ:固定相的填充不均匀因子 固定相颗粒越小dp↓,填充的越均匀,A↓,H↓,柱效n↑。表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻,色谱峰较窄。 (动画) * 2. 分子扩散项—B B = 2 νDg ν :弯曲因子,填充柱色谱,ν1。 Dg:试样组分分子在气相中的扩散系数(cm2·s-1)。由于柱中存在着浓度差,产生纵向扩散: a. 扩散导致色谱峰变宽,H↑(n↓),分离变差。 b. 分子扩散项与流速有关,流速↓,滞留时间↑,扩散↑ c. 扩散系数:Dg ∝(M载气)-1/2 ; M载气↑,B值↓ * 3.传质阻力项— C 组分在气相和液相两相间进行反复分配时,遇到阻力。 传质阻力包括气相传质阻力Cg和液相传质阻力CL ,液相传质阻力大于气相传质阻力。 即: C =(Cg + CL) (动画) * 4. 载气流速与柱效-最佳流速 载气流速高时: 传质阻力项是影响柱效的主要因素,流速?,柱效?,右图曲线的右边。 载气流速低时: H - u曲线与最佳流速: 由于流速对这两项完全相反的作用,流速对柱效的总影响使得存在着一个最佳流速值,即速率方程式中塔板高度对流速的一阶导数有一极小值。 以塔板高度H对应载气流速u作图,曲线最低点的流速即为最佳流速。 分子扩散项成为影响柱效的主要因素,流速? ,柱效? ,右图曲线的坐边。 * 5. 速率理论的要点 (1)组分分子在柱内运行的多路径与涡流扩散、浓度梯度所造成的分子扩散及传质阻力使气液两相间的分配平衡不能瞬间达到等因素是造成色谱峰扩展柱效下降的主要原因。 (2)通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效。 (3)速率理论为色谱分离和操作条件选择提供了理论指导。阐明了流速和柱温对柱效及分离的影响。 (4) 各种因素相互制约,如载气流速增大,分子扩散项的影响减小,使柱效提高,但同时传质阻力项的影响增大,又使柱效下降;柱温升高,有利于传质,但又加剧了分子扩散的影响,选择最佳条件,才能使柱效达到最高。 * 五、 分离度 塔板理论和速率理论都难以描述难分离物质对的实际分离程度。即柱效为多大时,相邻两组份能够被完全分离。 难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响:保留值之差──色谱过程的热力学因素; 区域宽度──色谱过程的动力学因素。 色谱分离中的四种情况如图所示: ① 柱效较高,△K (分配系数)较大,完全分离; ② △K 不是很大,柱效较高,峰较窄,基本上完全分离; ③柱效较低,,△K 较大,但分离的不好; ④ △K 小,柱效低,分离效果更差。 * 分离度的表达式: R =0.8:两峰的分离程度可达89%; R =1.0:分离程度98%; R =1.5:达99.7%(相邻两峰完全分离的标准)。 * 六、色谱检测装置
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