高效液相色谱固定相的新进展10.20.doc

内容 小滑流色谱法580年 粒子进步和限制579 核壳粒子580 整体柱581 商品柱 581 专家和供应商继续在高效液相色谱法(HPLC)的理论、性能和实用性方面取得进步理论。它是最常用的分析技术，而且几乎跨越了每一个化学的应用。 许多使用者,甚至于是运行高效液相色谱仪器许多年的成功者并且产生有用的数据,可以从最近的知识如什么是可能的、什么改变了、什么即将发生中获益。当没有可靠的方法即替换的成本和潜在收益是不确定时，几乎没有动力去更新或替换旧的。 对于先进的的医师来说，明白现在什么是必要的和即将发生的是至关重要的。 我们将主要侧重于发展的最后2年,但将包括几个以前的重要性的报告。引用可以并不透彻,但能表示表示最近的工作和进展。 虽然高效液相色谱法和超临界流体色谱(SFC)仍然是单独练习,它们的区别开始模糊,许多固定相都可以被用于这两个技术。 所以,我们将纳入一些发展来适用于超临界流体色谱。同时,非手性固定相将是我们的重点。 手性固定相的发展最近在这个杂志上被报导。 似乎有尽可能多的描述类型的创新有作者写关于创新的过程。最简单和最常见的创新是连续的,也就是说,推断或直接和可预测性的扩展是从当前实践中获取的。最大的和最重要的创新,真正的游戏改变者,是不连续的。 他们在提高或替换当前的实践的过程中，被描述为激进的、革命性的或破坏性的。 高效液相色谱法是建立在大量的创新之上的。仪器要求泵、进样器、探测器、记录器、数据处理等的发展。流动相的创新包括混合溶剂(调整强度),梯度洗脱,缓冲区和添加剂的使用,温度控制(当然这也影响到固定相的化学性),和出口压力控制(使浓缩或压缩气体加入流动相)。固定相的创新包括更好的吸附剂,结合相,薄膜粒子,孔隙大小控制,球形粒子,B型二氧化硅、手性固定相,边缘盖,极封端,嵌入式极性基团,混合的二氧化硅,聚合物粘结等。这些改进当连续或不连续时，作为他们实际需要的能力并不是很重要。 小粒子的进步性和局限性 完全多孔固定相粒子的直径在高效液相色谱法的历史以相当规律的速度减小。在1970年中期，10μm直径的 粒子被广泛应用。 直径减少的好处是完全可预测的,颗粒大小(和塔板高度)减少与泵的改善,附加柱体积的减少,数据采集的快速性相关,直到在1990年商业粒子达到约2.5μm。在40-MPa(6000 - psi)泵要求实际的粒度的限度,特别是如果一个缓冲在一种方法中是需要的，允许一个柱的使用如果柱的电阻会随年份的增长或者是一个粘性溶剂系统(比如水-甲醇)所需要的。 整体柱大约1996年出现。第一个商业产品出现在2000年,是具有破坏性的:填料塔的时间相比,这些整体柱有可能显著地提高塔板高度和速度分析,他们需要相当少的压力。对于常规的包装柱在效率和速度方面竞争,颗粒大小必须减少到2μm以下,输送压力必须大幅增加,附加柱体积缩小 。因此诞生了超高效液相色谱法(UHPLC)和能够利用近-2-μm固定相的新一代的工具。 今天我们已接近甚至达到通过超高效液相简单的极限粒径减少与完全多孔粒子固定相来提高性能。 这个限制是由于流动相的摩擦加热,由此产生的径向温度梯度产生的加热,而且径向梯度导致了峰展宽。另一个限制是用当前技术使用更小的颗粒填料相同的河床的困难。额外的改进可能需要一个或多个不连续。 滑流色层分析 也许最有趣的新可能性是高效液相色谱中滑流条件的使用,最近被Wei, Rogers, and Wirth所证实。 图1，哈根的泊肃叶流(防滑涂层,如传统的高效液相色谱法)和滑流。 通道是速度矢量箭头。 注意,在通道壁上有哈根-泊肃叶条件的速度是零而不是在通道壁上有移动滑流条件。 还要注意滑移流条件速度范围的减少。 滑流,图1,在微机电系统(MEMS)是一个著名的现象:在普通流道壁(无滑动或哈根泊肃叶流)条件下流动相流速为零,与传统的高效液相色谱法,但通道直径的减少最终导致滑流条件，即流动相实际上与通道壁的表面移动的相反。结果是相比于没有流动条件下的压力，所需的压力的大幅降低。 另一个好处峰展宽的大量减少，在流动通道中速度窄的范围,这些速度差异是传统的高效液相色谱法的扩大的主要来源。 作者使用470 nm煅烧的二氧化硅胶体粒子，泥浆挤进75 -μm直径2.5厘米长床熔融石英管然后甲烷硅基化的。 作者显示色谱使牛血清白蛋白和标记的单克隆antiprostate特异抗原,他们取得了超过一百万理论板块在大约2分钟。还有大量工作要做这个演示变成实际的能力。 例如,没有报告但性能与小的溶质。 方便注射提供极其微小的初始乐队是必需的。 作者发现使用荧光显微镜和溶质乐队直接在列,所以postcolumn检测仍有待探索。 此外,实际列必须开发生产技术。然而,如果潜在的最终意识到在