食品中食品中山梨酸的测定.docVIP

食品中山梨酸的测定 第一法 气相色谱法5　原理　　　　　　样品酸化后,山梨酸用乙醚提取浓缩后,用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定,与标准系列比较定量。6　试剂6.1　乙醚。6.2　石油醚：沸程30～60℃。6.3　盐酸。6.4　无水硫酸钠。6.5　山梨酸标准溶液: 精密称取山梨酸0.2000g,置于100ml容量瓶中,用石油醚-乙醚(3：1)混合溶剂溶解后并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于2mg山梨酸。6.6　山梨酸标准使用液：吸取适量的山梨酸标准溶液,以石油醚-乙醚(3：1)混合溶剂稀释至每毫升相当于50、100、150、200、25Oμg山梨酸。7　仪器　　气相色谱仪：具氢火焰离子化检测器。8　操作方法8.1　样品提取　　按4.1自“称取2.5g”至“加乙醚至刻度”依法操作。准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度试管中,置40℃水浴上挥干,加入2ml石油醚-乙醚(3：1)混合溶剂溶解残渣,备用。8.2　色谱条件8.2.1　色谱柱：玻璃柱,内径3mm,长2m,内装涂以5%DEGS+1%H3PO4固定液的60～80目Chromosorb W AW。8.2.2　气流速度: 载气,氮气,50ml/min(氮气和空气、氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件。)8.2.3　温度：进样口 230℃;检测器230℃;柱温170℃。8.3　测定　　进样2μL标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中,可测得不同浓度山梨酸,苯甲酸的峰高,以浓度为横坐标,相应的峰高值为纵坐标,绘制标准曲线。同时进样2μL样品溶液,测得峰高与标准曲线比较定量。8.4　计算  式中：X2──样品中山梨酸的含量,g/kg;　　　A3——测定用样品液中山梨酸的含量,μg;　　　V3——加入石油醚—乙醚(3：1)混合溶剂的体积,mL；　　　V4─—测定时进样的体积,μL；　　　m2──样品的质量,g;　　　 5─—测定时吸取乙醚提取液的体积,mL;　　　25──样品乙醚提取液的总体积,mL。　　由测得山梨酸的量乘以1.18,即为样品中山梨酸钠的含量。 第二法 高效液相色谱法 原理： 试样加温除去二氧化碳和乙醇，调pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。 试剂： 1.甲醇:经滤膜(0.45um)过滤。 2.稀氨水(1+1):氨水加水等体积混合。 3.乙酸按溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸按，加水至1000mL,溶解，经0.45um滤膜过滤。 4.碳酸氢钠溶液(20g/L):称取2g碳酸氢钠(优级纯)，加水至100mL，振摇溶解。 5.山梨酸标准储备溶液:准确称取0.1000g山梨酸，加碳酸氢钠溶液(20 g/L)5mL，加热溶解，移人100mL容量瓶中，加水定容至100mL，山梨酸含量为1mg/mL，作为储备溶液。 6.山梨酸标准混合使用溶液:取山梨酸标准储备溶液各10.0mL，放人100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含山梨酸各0.1mg/mL。经0.45um滤膜过滤(同时测定糖精钠时可加GB/T 5009. 28-2003中3.4糖精钠标准储备溶液)。 分析步骤： 1 试样处理 1.1 汽水:称取5.00g-10.0g试样，放人小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水(1+1)调pH约7。加水定容至10mL-20mL，经滤膜(HA 0.45um)过滤。 1.2 果汁类:称取5.00g --10.0g 试样，用氨水(1+1)调pH约7，加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经0.45um滤膜过滤。 1.3 配制酒类:称取10.0g试样，放人小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水(1+1)调pH约7，加水定容至适当体积，经0.45um滤膜过滤。 2 高效液相色谱参考条件 2.1 柱:YWG-C18，4.6 mmX250mm,10um不锈钢柱。 2.2 流动相:甲醇，乙酸铵溶液(0.02mol/L)(5：95), 2.3 流速:1mL/min, 2.4 进样量:10uL, 2.5 检测器:紫外检测器，230nm波长，0.2AUFS, 根据保留时间定性，外标峰面积法定量 3 结果计算 试样中山梨酸的含量按式(2)进行计算。 式中 : X—试样中山梨酸的含量，单位为克每千克(g/kg); A—进样体积中山梨酸的质量，单位为毫克(mg); V2—进样体积，单位为毫升(mL); V1—试样稀释液总体积，单位为毫升(mL); m—试样质量，单位为克(9)。 计算结果保留两位有效数字。