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川参通注射液中糖的比色测定方法研究 川参通注射液中糖的比色测定方法研究 更新日期：2009-10-24 点击： 申庆亮　唐启令 　　川参通注射液是由丹参、当归、川芎、麦冬等中药制成。在生产过程中经过高浓度(80%)乙醇处理，去除了多糖及鞣质、树胶等其他大分子物质。为了有效地保证注射液的质量，尽可能弄清楚其主要成分的含量，在研究测定本品原儿茶醛、总黄酮方法的基础上，又进一步研究了用比色法测定川参通注射液中糖的含量的测定方法。 1　实验材料 　　川参通注射液(中国人民解放军第91医院提供，每ml含生药1.1 g)；无水葡萄糖，分析纯；蒽酮，化学纯；硫酸，分析纯；紫外分光光度计(UV-240，日本岛津)。 2　标准曲线的制备 2.1　对照品溶液的配制：精密称取无水葡萄糖30.0 mg，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀即得(每ml中含无水葡萄糖0.3 mg)。 2.2　显色剂的配制：称取蒽酮0.2 g，加80%(V/V)硫酸溶液100 ml，使溶解，摇匀即得(临用时现配)。 2.3　测定波长的确定：取对照品溶液及样品溶液，按标准曲线绘制方法项下，自“加水至2.0 ml……”起，至“照分光光度法(《中国药典》1995年版1部附录VB页)”止，于600～700 nm波长范围内扫描，结果样品与对照品溶液均在625 nm波长处有最大吸收。 2.4　标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 ml，分别置于10 ml量瓶中，各加水至2.0 ml，加新鲜配制的蒽酮硫酸溶液至刻度，摇匀，置沸水中加热5 min，取出，再置冰浴中冷却5 min后，照分光光度法(《中国药典》1995年版1部附录VB页)在625 nm波长处测定吸收度。结果见表1。 表1　葡萄糖量与吸收度的关系 浓度(mg) 0.000 0.030 0.060 0.090 0.120 0.150 吸收度　 0.000 0.162 0.326 0.472 0.614 0.788 　　以吸收度与葡萄糖量作回归分析，得回归方程：C=0.1942A-0.00 012 γ=0.9 993，表明吸收度与葡萄糖含量在0～0.15 mg之间呈良好线性关系。 3　方法学考察 3.1　蒽酮-硫酸显色剂的稳定性考察：按样品测定方法项下，依法测定。室温下在0、10、20、30、40、50 min时分别测定，其吸收值为0.485、0.482、0.480、0.478、0.476、0.472。提示，在30 min内测定是稳定的。 3.2　精密度试验：精密吸取同一样品(950918)稀释液2 ml，置10 ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至2 ml……”起，测定6次，其吸收度为：0.446、0.446、0.445、0.447、0.447、0.446，平均为0.446±0.0 008，RSD%=0.169。 3.3　重现性试验：取同一样品(950918)的稀释液2 ml，置10 ml量瓶中，同时作6份，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至2 ml……”起，依法测定，测定结果见表2。 表2　川参通注射液重现性试验结果 测定次数 含量(mg/ml) 平均浓度 RSD(%) 1 53.21 　 2 53.33 　 3 53.33 53.53±0.37 0.68 4 53.53 　 5 53.94 　 6 54.06 　 3.4　回收试验：分别精密吸取样品稀释液(950918)1 ml，共6份，其中1份作对照，加外5只加入葡萄糖对照液(0.3 mg/ml)0.3 ml，照标准曲线制备方法项下，自“加水至2 ml……”起，依法测定。测定结果见表3。 表3　川参通注射液注射液回收试验结果 加样量 (mg) 实测得量 (mg) 回收率 (%) 平均回收率 (%) RSD (%) 0.09 0.091 101.2 　 0.09 0.094 104.4 　 0.09 0.092 101.8 101.64±1.69 0.017 0.09 0.0899 99.9 　 0.09 0.091 100.9 4　样品测定 　　精密吸取样品0.2 ml，置250 ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀(文中简称为稀释液)精密吸取稀释溶液2 ml，置10 ml量瓶中，照标准曲线的制备项下，自“加水至2.0 ml……”起，依法测定吸收度，代入回归方程，计算，即得。结果见表4。 表4　川参通注射液糖含量测定结果(mg/ml) 批　号 含量 950918(n=6) 53.53 950913(n=3) 57.6 950118(n=3) 58.4 5　讨论 5.1　糖和多糖广泛存在于中药中。尤其是根类中药中含量更