高超速离心技术及离心过程中应注意(精选).docVIP

高、超速离心技术及离心过程中应注意的事项 在生物科学和医学领域中离心机主要用于分离细胞和细菌；纯化和收集病毒、RNA、DNA、质粒和蛋白质等生物大分子。 一. 离心机的组成 离心机主要有驱动电机、制冷系统、真空系统（超离有）、显示系统、自动保护系统和控制系统组成。必要的配件为离心转头和离心管。 二. 离心转头的选用 在离心中最常使用的转头是角度头和水平头。 角度头常用于差速离心来分离s（沉降系数）值相差较大（1：10）的样品。 2. 水平头常用于密度梯度或等密度离心。 另有一种垂直转头使用较少，此转头主要用于等密度离心，以缩短 离心时间。 三. 离心管的选用 玻璃离心管不能在高速或者超速离心机上使用。 PP polypropyiene，聚丙烯 半透明。化学及温度性能稳定，但低温下发脆。不要在4℃以下离心。 PA polyallomer，聚丙烯和聚乙烯的聚合物 半透明。化学性质最稳定，但高温易变软。 CAB cellulose acetobutyrate，醋酸丁酯纤维素 　LH为0－15℃下使用，HT为20－40℃下使用。透明。可用于较稀的酸、碱、盐。但当pH 8以上，有机溶剂，重盐如CsCl时仅有限条件下可用。适用于酒精及蔗糖梯度。 PC polycarbonate，聚碳酸酯 ：透明度好，硬度大，能耐高温消毒。但不耐强酸强碱及某些有机溶剂如酒精、油、MDSO。可不装满。主要用于5万rpm以上离心。 PCR polyclear，超透明 　与PC相似，但比PC更硬 PE polyethylene，聚乙烯 不透明。对丙酮、醋酸、盐酸等稳定。高温易变软，必须装满。 PS polystyrol，聚苯乙烯 　透明坚硬。对大多数水溶液稳定，但不能沾许多有机物，一次性使用。多用于低速离心。 PF polyflor，聚氟 　-100℃－140℃下使用，半透明。 不锈钢　能抗热，抗化学腐蚀，能高压消毒，但较重，也较贵。 CN管：质地较软，透明，但不耐强酸强碱及某些有机溶剂，不能高压消毒。适合于蔗糖、甘油等密度梯度离心。透明，利于收集。 注意事项 对称平衡：当离心转速达1－5万（转/分）时，如对称管相差1克，转头半径5厘米，则 离心力公式 F m×RCF 查表得：1万（转/分） RCF 6000 代入公式 F 1×6000 6 公斤 5万（转/分） RCF 150000 代入公式 F 1×150000 150 公斤 此时引起两边不平衡可达6－150 公斤 ，这对离心机的损 伤是很大的，至少将缩短离心机的使用寿命。 如离心管盖子密封性差液体就不能加满（针对高速离心且使用角度头），以防外溢。 失去平衡 外溢后果 污染转头和离心腔 影响感应器正常工作 超速离心时，液体一定要加满离心管，因超离时需抽真空，只有加满才能避免离心管变形。 使用角度头时别忘盖转头盖，如未盖，离心腔内会产生很大的涡流阻力和摩擦升温，这等于给离心机的电机和制冷机增加了额外负担，影响离心机的使用寿命。 五.与离心相关的常用参数和公式 参数 公式 常数 单位 名称 V V ωr 厘米/秒 线速度 ω ω 2ЛN/60 弧度/秒 角速度 r 厘米 半径 N 转/分 转速 RCF RCF ω2r/g C×N2r g 相对离心场 C C 1.118×10-5 g g 980厘米/秒2 厘米/秒2 重力加速度 F F RCF×m 克 离心力 m 克 质量 F1 F1 mρrω2/б 克 浮力 F2 F2 3Лd? dr/dt 克 摩擦力 F F RCF×m 克 离心力 ρ 克/厘米2 液体密度 б 克/厘米2 样品颗粒密度 d 厘米 颗粒直径 ? 介质粘度 dr 厘米 瞬时距离 dt 秒 瞬时时间 s s dr/dt × 1/ω2r 10-13 S 沉降系数 t t 350.4/sN2 ×log rmax/rmin 分钟 时间 N N 350.4/st ×log rmax/rmin 0.5 转/分 转速 ω ω 2.303/st ×log rmax/rmin 0.5 弧度/分 角速度