实验三_果蝇的伴性遗传.ppt

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实验三_果蝇的伴性遗传

方法步骤 取肥大的三龄幼虫在载玻片上 解剖唾腺:滴加1滴生理盐水,在解剖镜下,左手针按住幼虫后1/3处,右手持针压住头部向外拉,可将一对半透明的袋状唾腺拉出 酸处理:剥离脂肪体,加1滴1N盐酸1分钟 染色:吸掉盐酸,用水洗净后滴加染料,10分钟后盖片、压片(用力适当) 显微观察(5条长臂+1条短臂) X,2L,2R,3L,3R 实验三 果蝇的伴性遗传与三点测验 厦门大学生命科学学院 实验目的 了解性别决定的原理,正确认识伴性遗传正、反交的差别,进一步认识伴性遗传的特点,记录杂交结果,掌握统计处理方法 掌握三点测验进行基因定位的方法,加深对三点测验原理的理解。 伴性实验图示 白眼♂ X P F1 ♂ ♀ ♀ ♀ F2 ♂ 白眼♂ 红眼♀ Y非同源区段:在X上无相应的等位基因 X染色体 Y染色体 X、Y同源区段:有相应的等位基因 X非同源区段:在Y上无相应的等位基因 X、Y染色体模式图 实验材料 1.? 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster) 野生型(红眼)X+X+ X+Y 突变型(白眼)XwXw XwY 果蝇都在纯合系统中进行原种保存,实验前重新接种,等幼虫化蛹后,赶走亲本,在一定时间间隔内(8-12h)收集羽化后成虫,分开雌雄,保证雌性个体皆为处女蝇用作今天的实验。 ?2.? 培养基、平皿、毛笔、乙醚、锥形瓶、双筒解剖镜 实验步骤 1.分别收集野生型和突变型处女蝇(为什么?) 2.按A、B组合类型,分别选3-4对相应的雌雄蝇进行杂交培养 3.7-8天后,倒净亲本 4.3-4天后,F1代出现,挑选5对作杂交培养,并观察其性状 5.7-8天后,倒净F1成虫 6.3-4天后,F2代成虫出现。6天后,统一观察并统计。(每一类型的果蝇数不少于7只) 正反交(A、B)分组 纯合P ♀ X+X+ ╳ XwY ♂ ♀ XwXw ╳ X+Y ♂ ? F1 X+Xw ╳ X+Y XwX+ ╳ XwY ? F2 X+X+ XwX+ X+Y XwY X+Xw XwXw X+Y XwY 结果与分析 (正反交) C 性状 数据 雌 雄 红眼 白眼 红眼 白眼 F1(有/无) ? ? ? ? F2 实验值(O) ? ? ? ? 理论值(C) ? ? ? ? 偏差(O-C) ? ? ? ? (O-C)2 ? ? ? ? 思考题 在果蝇中,白眼(white)、樱桃眼(cherry)、朱红眼(vermilion)都是影响眼色的性连锁突变。这三个突变对野生型红眼基因来说都是隐形的。白眼雌蝇与朱红眼雄蝇杂交,产生白眼雄蝇和野生型红眼雌蝇;白眼雌蝇与樱桃眼雄蝇杂交,产生白眼雄蝇和淡樱桃眼雌蝇。根据这些结果,能否判断这三个影响眼色的突变是同一个基因的突变?如果是,是哪个基因突变? 三点测验的基因定位方法 原理 基因连锁现象中有少部分基因发生交换重组,交换率的高低与基因间的距离成正比,基因图距就是通过重组值的测定而得到的。 三点测验就是利用3对基因的杂合体,进行一次测交而确定3个基因点的位置的方法。 交换率=?重组率 如果基因间距离很近,重组率和交换率的值相等,可以直接根据重组率的大小作为基因间的相对距离,把基因顺序排列在染色体上,绘制出基因图。 如果相距较远,两个基因间往往发生两次以上的交换,这时重组值小于交换值,需要利用实验数据校正,以便正确估计图距。 染色体双交换 实验材料 野生型果蝇(+++): 红眼,长翅,直刚毛 三隐性果蝇(wmsn3): 白眼,小翅,焦刚毛 染色体交换产生 八种配子 三点测验杂交组合 野生♂ X P F1 ♂ ♀ F2 三隐性♀ Wmsn3 470 ++sn3 14 +m+ 112 W+sn3 71 +msn3 131 Wm+ 10 W++ 149 +++ 464 思考题 确定正确的基因次序,计算3对基因间的重组值和双交换值,并画出遗传学图。 假定三个基因在常染色体上,试设计三点测交的程序,与本实验比较有何不同? 为何要以白眼、小翅、焦刚毛的个体为母本?若以它为父本,能否进行三点测验?如果可以,请设计杂交的程序。 果蝇诱变实验设计 物理法 化学法 生物法 物理诱变剂的种类 典型的物理诱变剂是不同种类的射线,常见的有X射线,r射线和中子,此外还有紫外线和β射线。 X射线是种波长

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