第八原生质体培养和体细胞杂交精读.ppt

第八章 原生质体培养和体细胞杂交 一、原生质体研究概况 （一）、原生质体的基本概念 原生质体(protoplast)：指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞,即，植物细胞或细菌细胞去除细胞壁后剩余的部分。 （二）、原生质体研究进展 1880年，Hanstein首次起用原生质体(protoplast) 1960年，Cocking首次应用酶法制备番茄根原生质体获得成功。 1971年，Takebe et al.首次得到烟草叶肉原生质体培养的再生植株。 1985年，Fujimura et al.第一例禾谷类作物－水稻原生质体培养再生植株。 1986年，Spangenberg et al.单个原生质体培养再生植株在甘蓝型油菜上获得成功。 目前已有320多种以上植物的原生质体培养成功 （三）、原生质体研究的意义 1、再生植株 2、用于远缘体细胞融合，进行体细胞杂交获得杂种植株（创造细胞质杂种）。 3、遗传转化的良好受体 4、基础理论研究的实验材料 （一）、植物材料 要获得高质量的原生质体。必须选用生长旺盛、生命力强、幼嫩部分作为材料。 1、愈伤组织及细胞悬浮培养物 外植体 诱导出愈伤组织 筛选 悬浮培养 培养至3～4个月后，悬浮培养物大小一致，较浓时作为分离原生质体的材料 2．叶肉细胞 叶肉细胞是分离原生质体的最好的细