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牛转铁蛋白使用说明书.doc

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牛转铁蛋白使用说明书

牛转铁蛋白(饱和铁形态,冻干粉末,细胞培养级别) Transferrin, Bovine Holo Form, Powder Iron Rich, Cell Culture Grade 产品介绍: 转铁蛋白是血浆中主要的铁传递蛋白,为细胞内化和细胞代谢提供所需的铁。研究发现所有的细胞生长都离不开转铁蛋白。不但维持正常的细胞代谢依赖于以生物活性形态存在的铁,铁还是一些酶的辅助因子,比如RNA聚合酶,DNA合成酶。同时也是血红蛋白的重要组成部分。 转铁蛋白是血浆糖蛋白,从血浆中分离而来,牛转铁蛋白以两种分子形态存在,分子量分别为74KD和78KD。每个转铁蛋白分子通过C端和N端结构位点可以结合两分子铁离子,所以转铁蛋白以三种形态存在:脱铁(不结合铁离子),饱和铁(结合两分子铁离子)和部分饱和,在生理情况下,转铁蛋白分子仅有 1/3 被铁饱和。 使用说明: 转铁蛋白对于绝大部分细胞系在无血清培养基中生长是必需的,研究表明饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是最有效的形态。对于杂交瘤,黏连细胞和悬浮细胞系,在细胞培养过程中,应保持培养基中转铁蛋白浓度在0.5-100μg/ml。针对不同的细胞系,需要选择最合适的浓度。 J.H.Brock在小鼠淋巴细胞的无血清培养试验中【1】Larisa Tsavaler等在K562的无血清培养试验中【】,比较了人源转铁蛋白和牛源转铁蛋白的效果,结果显示两者在300ug/ml的浓度条件下,均能良好支持细胞生长,无显著差异。【】 质量控制: 产品质量从源头开始控制,牛血浆从正规农场定制,进行正规的检验检疫。经过多步色谱纯化得到的转铁蛋白,需进行60℃,10h的病毒灭活,然后用0.1μm滤膜过滤。产品最后要进行包括纯度,内毒素,酸碱度,铁含量,水分,微生物限度等检查,以确保产品符合细胞培养要求。 附图1、转铁蛋白的扫描图谱 附图2、转铁蛋白SDS图谱 1为marker,2为转铁蛋白 参考文献 1、J. H. Brock。The effect of iron and transferrin on the response of serum-free cultures of mouse lymphocytes to Concanavalin A and lipopolysaccharide。Immunology 1981,43:387~392。 2、Larisa Tsavaler, Barry S. Stein, and Howard H. Sussman。Demonstration of the Specific Binding of Bovine Transferrin to the Human Transferrin Receptor in K562 Cells: Evidence for Interspecies Transferrin Internalization。J C Physiol 1986,128:l~8。 3、Robert C. Penhallow, Anne Brown-Mason, And Robert C. Woodworth。Comparative Studies of the Binding and Growth-Supportive Ability of Mammalian Transferrins in Human Cells。J Cell Physiol 1986,128:251~260。 第 1 页 共 3 页

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