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骨髓细胞学检查（2）Cytological Examination Of Bone Marrow 北京大学第三医院检验科 Department of laboratory medicine , Peking University Third Hospital 实验目的 进一步学习骨髓细胞学检查的方法。 熟悉常用的细胞化学染色方法及意义。 掌握常见血液疾病的骨髓象特点。 实验内容 常用的细胞化学染色 贫血骨髓象 急性白血病骨髓象 慢性白血病骨髓象 1.常用的细胞化学染色General cyto-chemical stain 过氧化物酶染色(POX) 特异性酯酶染色(SE) 非特异性酯酶染色(NSE) 中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP) 酸性磷酸酶染色(ACP ) 过碘酸-雪夫反应(PAS)，糖原染色 铁染色(Iron stain) 将形态学与化学或生物化学相结合的技术。 利用具有较高特异性的化学反应对血细胞内的各种化学成分、代谢产物等在细胞原位作定性及半定量检测。 对血细胞类型鉴别，血液病的诊断和鉴别诊断有意义。 过氧化物酶染色(POX) Peroxidase stain 原理 血细胞中的POX能分解试剂中的底物H2O2，释出新生态氧，使联苯胺氧化为联苯胺蓝，后者与亚硝基铁氰化钠结合形成暗蓝色的颗粒，定位于细胞浆中。 POX存在于粒系细胞中，在晚期原粒细胞至成熟中性粒细胞以及各阶段嗜酸性粒细胞均呈阳性反应，细胞越成熟，反应越强。 嗜碱性粒细胞呈阴性反应。 单核系细胞自幼单核细胞起，呈弱阳性反应。 淋巴细胞系任何阶段均呈阴性反应。 临床意义 用于急性白血病的鉴别诊断。 急粒时，强阳性反应。 急单时，弱阳性或阴性反应。 急淋时，阴性反应。 对急粒与急淋的鉴别最有价值。 特异性酯酶染色(SE)Specific esterase stain 原理 又称粒细胞酯酶(粒细胞特异酶)，它能将基质液中的氯醋酸萘酚AS-D水解，产生萘酚AS-D，后者与重氮盐偶联生成有色沉淀，定位于细胞浆中。 晚期的原粒细胞呈弱阳性反应，早幼粒细胞呈强阳性反应，此后随细胞发育成熟而酶活性逐渐减弱。 嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞一般呈阴性反应。 临床意义 用于急性白血病的鉴别诊断。 急粒时，多呈强阳性反应。 急单时，一般阴性反应。 急淋时，均呈阴性反应。 对急粒和急单/急淋的鉴别有价值。 SE染色 非特异性酯酶染色(NSE)Nonspecific esterase stain 原理 NSE能将基质液中的α-醋酸萘酚水解，产生萘酚，萘酚再与重氮染料偶联生成不溶性的有色沉淀。 NSE是单核细胞的标记酶。单核系细胞一般呈强阳性反应。 粒系细胞一般为阴性或弱阳性反应。 淋巴系细胞一般呈阴性反应。 临床意义 急单时，染色呈强阳性，但酶活性能被氟化钠抑制。 急粒时，呈阴性或弱阳性反应，但酶活性不被氟化钠抑制。 主要用于鉴别急单与急粒。 其他 中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP) 类白血病和慢粒反应的鉴别 再障和PNH的鉴别。 化脓性感染和病毒性感染的鉴别。 酸性磷酸酶染色(ACP ) 毛细胞白血病的诊断。 Gaucher细胞与Niemann-Pick的鉴别。 2.贫血Anemia Iron deficiency anemia：因体内贮存铁缺乏使血红蛋白合成不足，主要特征是红细胞呈小细胞低色素性改变。 Megaloblastic anemia：由于维生素B12和或叶酸缺乏致使DNA合成障碍，特征是出现巨幼红细胞，其他系统的血细胞也有改变。 Hemolytic anemia：由于各种原因使红细胞寿命缩短，破坏增加，超过骨髓造血能力所引起的一组贫血，特征是红细胞系明显的代偿性增生。 Aplastic anemia：由多种病因引起的骨髓造血功能衰竭，出现全血细胞减少的一组综合病症。 Iron deficiency anemia(IDA) 增生明显活跃。 粒红比值减低。 红细胞系明显增生，幼稚红细胞百分比常30%，以中、晚幼红细胞为主。幼红细胞体积小，边缘不规整，胞核小而致密，胞浆量少，因血红蛋白合成不足而着色偏碱。成熟红细胞体积小，中心淡染区扩大，严重时可呈环状红细胞。易见嗜多色性红细胞。 粒细胞系相对减少，但各阶段比例及细胞形态大致正常。 巨核细胞系正常。 Megaloblastic anemia 增生明显活跃。粒红比值明显减低。 红系明显增生，幼红细胞百分比常40%，以早及中幼红细胞为主。出现各阶段巨幼红细胞，巨幼红细胞与相应阶段的正常红细胞相比，胞体及胞核均增大，核染色质纤细、疏松，着色浅淡。胞浆量丰富，呈核浆发育不平衡，细胞核的发育落后于胞浆。成熟红细胞明显大小不均，呈高色素