第18章 氨基酸和蛋白质.pptVIP

第十八章 氨基酸、多肽、蛋白质和核酸 * 第一节 氨基酸 一、氨基酸的分类、结构和命名 按照氨基连在碳链上的位次不同而分为α, β, γ,…, ω-氨基酸。由蛋白质水解得到的氨基酸大多数是α-氨基酸，且仅有二十几种（如表18.1，P457），它们是组成蛋白质的基本单位。 除甘氨酸外，都有手性碳，天然氨基酸几乎都是L构型—α-C上的－NH2在Fischer投影式中朝左。 L-甘油醛 L-α-氨基酸 L-丝氨酸 练习 p458 问题18.1、18.2 二、氨基酸的物理性质 氨基酸是没有挥发性的粘稠液体或结晶固体。固体氨基酸的熔点很高。例如mp.(NH2CH2COOH)292℃,并分解，而mp.(CH3COOH) 16.6℃。 一般的氨基酸能溶于水，不溶于乙醚、丙酮和氯仿等非极性有机溶剂。 原因：氨基酸一般以偶极离子NH3+CHRCOO-的内盐形式存在 氨基酸具有氨基和羧基的典型性质，也具有氨基和羧基相互影响而产生的一些特殊性质。 P460 偶极距大 P460 正离子 偶极离子 负离子 1、 两性和等电点 氨基酸因含有氨基和羧基，既能与酸又能与碱反应，是两性化合物。分子内的氨基与羧基也能反应生成盐，这种盐称为内盐，亦称两性离子或偶极离子。α-氨基酸的物理性质也说明它是以内盐形式存在的。 三、氨基酸的化学性质 强酸性溶液中(pH=0) 强碱性溶液中(pH=14) 主要存在形式 主要存在形式 当溶液为某一pH时，负离子和正离子浓度相等，净电荷等于零，在电场中氨基酸既不向正极也不向负极移动，这时溶液的pH称为该氨基酸的等电点(用pI表示)，不同的氨基酸具有不同的等电点(见表18.2 P461)。 在等电点时，偶极离子的浓度最大，氨基酸在水中的溶解度最小，因此利用调节等电点的方法，可以分离氨基酸的混合物。 α-氨基酸分子中的氨基具有典型氨基的性质，例如能与酸、亚硝酸、烃基化试剂、酰基化试剂等反应。 2、氨基的反应 测定伯氨基—范斯莱克Vanslyke法 鉴别氨基酸 保护氨基 3、羧基的反应——酯化P462 4、与水合茚三酮反应 α-氨基酸水溶液与水合茚三酮反应，生成蓝紫色物质。 水合茚三酮 (蓝紫色物质) 反应很灵敏，水合茚三酮显色反应与离子交换层析法结合，广泛用于鉴别氨基酸以及定量测定氨基酸的浓度。 5、肽的形成 肽键 二个氨基酸形成的肽叫二肽。 四、α-氨基酸的合成 1、α-卤代酸的氨化 P463 问题18.3 2、N-取代氨基丙二酸酯的烃化 P464 问题18.4 3、Strecker合成 P464 问题18.5 18.6 五、α-氨基酸的拆分 P465 第二节 肽 一、肽的结构和命名 根据肽分子中?-氨基酸的数目分为：二肽、三肽及多肽。超过50个叫蛋白质，此时分子量超过10000，分子不能通过半透膜。 在肽链中，有游离氨基的一端叫N端，有游离羧基的一端叫C端。 N端写在左， C端写在右，命名时由N端开始，称某氨酰某氨酸，也可用简写表示。 例如： 甘氨酰丙氨酸（甘－丙） N端 C端 甘氨酰丙氨酰丝氨酸（甘－丙－丝） 在酸或碱的作用下，肽键断裂生成氨基酸的混合物。然后采取适当的方法，如电泳、离子交换层析或氨基酸分析仪等，测定氨基酸的种类和数量。 二、多肽结构的测定 1、肽水解—氨基酸分析 2、氨基酸顺序的测定 两个不同的氨基酸组成二肽时，有两种连接方式；随组成肽的氨基酸的数目增多，理论上的连接方式也随之增加。由三个不同氨基酸形成的三肽可能有六种，四肽可能有二十四种，五肽以上则更多。由此可以看出，要确定肽的结构是很困难的。Sanger F由于确定了胰岛素(一种多肽)的结构，于1958年获得诺贝尔奖。 测定肽中氨基酸顺序通常有两种方法： 一是端极分析：选择适当的试剂与肽链的N端或C端作用，然后水解，则含有此试剂的氨基酸一定是链端的氨基酸，这叫端基分析。 另一种是选择性水解：用某些酶将原来的肽链水解为较小的片断，测定片断中C—端和N—端氨基酸，再分析每一片断的氨基酸组分；然后将碎片拼起来得到完整的顺序 2,4-二硝基氟苯（Sanger试剂）与N端的氨基作用，生成的取代多肽用酸水解后，N端氨基酸就生成黄色的2，4-二硝基苯基氨基酸，容易与其它氨基酸分开。用层析法与标准样比较，即可鉴定N端是哪一种氨基酸 (1) N端分析： ①桑戈尔法 丹酰氯，即：5-（二甲氨基）萘-1-磺酰氯也能与多肽N-端的游离氨基反应，生成的取代多肽水解后，得到能发荧光的N-丹酰氯氨基酸(丹酰氯本身不发荧光)，可以用纸层析法或薄