微生物气溶胶的过去、现在及将来分析.pptxVIP

01 Bioaerosol的研究历史 背景简介 什么是bioaerosol 什么是bioaerosol 为什么要研究bioaerosol 为什么要研究bioaerosol 为什么要研究bioaerosol 生物气溶胶，通常是指空气动力学直径在100μm以内的含有微生物和其他物成分的气溶胶，主要包括细菌、病毒、真菌、放线菌、昆虫（包过尘螨等）及其碎片和分泌物、立克次体、花粉、蕨类孢子和各种菌类毒素等 背景简介 1 发展进程 与传统学科相比，仍有许多问题需要解决！ 02 Bioaerosol的样品采集 液体捕捉法 撞击法 静电沉降法 气溶胶到水溶胶的采样过程，大体积采样和是否便携是两个关键考虑因素，如BioSampler 以培养基为采集介质，微生物撞击并附着在培养基上。如BioStage和Andersen六级采样器 通过静电场力的作用将带电的生物气溶胶颗粒收集到采样介质上。 2 生物气溶胶的样品采集 由于不同颗粒物物理性质不同，分别适用于不同的采样方式 膜过滤法 使用滤膜截留微生物颗粒。 Andersen六级生物采样器和BioStage采样器都以培养基为采样介质，微生物被采集后直接在培养基上培养。 Andersen生物采样器是在普通六级采样器的基础上改造的，是为了模仿人的呼吸系统而设计的：第一层（最上面的一层）代表人的鼻腔和口腔；第二层代表咽部；第三层代表气管和主支气管；第四层代表支气管；第五层代表终端支气管；第六层是肺泡（Andersen, 1958）。 BioStage和Andersen六级生物采样器为均为28.3L/min 在低采样速率和高的静电场条件下，静电采样法对空气中的过敏原和毒素的采集效果比BioStage更突出。与液体捕捉采样法相比，静电采样法需要消耗更低的能耗，采样效果受静电场强、采样速率及目标微生物所带电荷影响，在一定的条件下对0.3~0.5μm的颗粒的采样效率可以达到90%。 2 生物气溶胶的样品采集 Biosampler液体撞击采样器可以收集可吸入颗粒，同时避免了以往液体采样器存在的一些问题，如颗粒回弹、二次汽化及保存生物颗粒的完整性等。该采样器对于粒径在0.5μm以上颗粒的收集效率大约为90%。 BioSampler流量为12.5 L/min。 采样器 采样体积 采样方式 样品环境 回收率 Omni 3000 wet concentrator sampler 4155-8130L PM10气溶胶收集到无菌DNA的PBS缓冲液中 养猪场，诊所和避难所室内空气 61% Bio Sampler 375L 将PM10收集到无菌无DNA的水中，该溶液用47mm无菌聚碳酸酯膜过滤 养猪场样品 69% Mini-Vol 采样器 22752L 将PM10颗粒收集到47mm无菌聚碳酸酯膜上 半都市室外空气样品 84% 中等体积URG采样器 190080L 收集到47mm无菌聚碳酸酯膜上 森林室外空气样品 中速双头过滤采样器 72000L 无菌47mm石英滤膜 农业和城市室外空气样品 2 生物气溶胶的样品采集 静电场采样器 自动监测采样器 2 生物气溶胶的样品采集 03 基于PCR的Bioaerosol的分析技术 3 基于PCR的Bioaerosol分析技术 DNA提取 PCR qPCR 克隆 DEEG 3 基于PCR的Bioaerosol分析技术 04 宏基因组分析Bioaerosol