第八章核算代谢和蛋白质的合成.pptxVIP

DNA的生物合成—复制 DNA是遗传的物质基础 DNA分子贮存着生物体的遗传信息 基因是遗传信息的功能单位复制逆转录中心法则重点转录翻译复制DNARNA蛋白质请做笔记第一节 DNA的复制一、与DNA复制有关的酶和蛋白质 原料：四种脱氧核苷三磷酸（dATP、dGTP、dCTP、dTTP) 模板：以DNA的两条链为模板链，合成子代DNA。 引物：一小段RNA(或DNA）为引物，在大肠杆菌中，DNA的合成需要一段RNA链作为引物。与DNA合成有关的酶系：1、引物酶 本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶，该酶以DNA为模板，按照碱基配对原则，聚合一段RNA短链引物(primer)，以提供自由的3’-OH，使子代DNA链能够开始聚合。 2、DNA聚合酶:以DNA为模板的DNA合成酶，其催化反应的特点:（1）以四种脱氧核苷酸三磷酸为底物；（2）反应需要有模板的指导；（3）反应需要有3?-OH存在；（4）DNA链的合成方向为5’? 3’3‘5‘3‘5‘OHP 3 .DNA连接酶（1967年发现）：若双链DNA中一条链有切口，一端是3’-OH，另一端是5‘-磷酸基，连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接。在一条链上失去一个磷酸二酯键称为切口（nick）。失去一段单链称为缺口（gap)。DNA连接酶催化的条件：① 需一段DNA片段具有3′-OH，而另一段DNA片段具有5′-Pi基团；② 未封闭的缺口位于双链DNA中，即其中有一条链是完整的；③ 需要消耗能量，在原核生物中由NAD+供能，在真核生物中由ATP供能。DNA连接酶在DNA复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用。4、拓扑异构酶(topoisomerase)或旋转酶：　拓扑异构酶Ⅰ可使DNA双链中的一条链切断，松开双螺旋后再将DNA链连接起来，从而避免出现链的缠绕。 拓扑异构酶Ⅱ可同时切断DNA双链，再将其连接起来，以消除复制叉前进时DNA过度的扭曲。5、解螺旋酶（解链酶）：通过水解ATP将DNA两条链打开。E.coli中的rep蛋白就是解螺旋酶，还有解螺旋酶I、II、III。每解开一对碱基需要水解2个ATP分子。 rep蛋白沿3’?5’移动，而解螺旋酶I、II、III沿5’?3’移动。单链结合蛋白(SSB)[DNA结合蛋白] 这是一些能够与单链DNA结合的蛋白质因子。其作用为：① 使解开双螺旋后的DNA单链能够稳定存在，即稳定单链DNA，便于以其为模板复制子代DNA；② 保护单链DNA，避免核酸酶的降解。请做笔记二、DNA复制的特点（一）DNA的半保留复制定义：由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。半保留复制的实验证据:1958年Meselson和Stahl用同位素15N标记大肠杆菌DNA,首先证明了DNA的半保留复制。15N-DNA的密度大于14N-DNA的密度（二）有一定的复制起始点 　 在原核生物中，复制起始点通常为一个，而在真核生物中则为多个。 复制子:基因组中能单独进行复制的单位,每个起始点到终止点的区域为一个复制子。（三）双向复制 　DNA复制时，以复制起始点为中心，向两个方向进行复制。但在低等生物中，也可进行单向复制。（四）半不连续复制 　由于DNA聚合酶只能以5′→3′方向聚合子代DNA链，即模板DNA链的方向必须为3′→5′。因此，分别以两条亲代DNA链作为模板聚合子代DNA链时的方式是不同的。以3′→5′方向的亲代DNA链作模板的子代链在复制时基本上是连续进行的，其子代链的聚合方向为5′→3′，与复制叉移动的方向相同，这一条链被称为领头链(leading strand)或前导链。以5′→3′方向的亲代DNA链为模板的子代链在复制时则是不连续的，其链的聚合方向也是5′→3′，与复制叉移动的方向相反，这条链被称为随从链(lagging strand)或滞后链。由于亲代DNA双链在复制时是逐步解开的，因此，滞后链是由许多5′→3′合成的片段组成的。DNA在复制时，由滞后链所形成的一些子代DNA短链称为冈崎片段(Okazaki fragment)。（五）DNA复制的保真性：　为了保证遗传的稳定，DNA的复制必须具有高保真性。DNA复制时的保真性主要与下列因素有关： 1．遵守严格的碱基配对原则； 2．DNA聚合酶在复制时对碱基的正确选择； 3．对复制过程中出现的错误及时进行校正。DNA的生物合成 双链的解开 RNA引物的合成 DNA链的延伸 切除RNA引物，填补缺口，连接相邻的DNA片段起始延伸终止一、DNA复制的起始① 识别起始位点：互相缠绕的双链母本DNA，复制从特定的位置开始，该位置常是富含A、T区段。复制起始处的DNA片段复制叉②DNA解链：首先DNA解螺旋酶打开