徐亚飞综述.doc

多倍体鱼类的研究和开发现状 “多倍体”这个名词是由Winkler在1916年首先使用，它是指每个体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体。因为鱼类染色体与其他脊椎动物相比，具有较大的可塑性，易于加倍，可使单倍体形成二倍体及由二倍体形成多倍体；多倍体鱼类具有生长速度快、抗病力强、适应性强、成活率高和饲养管理方便等多方面的优点。多倍体鱼类的研究和开发已经成为目前水产养殖领域的热点问题。目前的多倍体鱼类研究主要集中在促进鱼类生长、控制鱼类过度繁殖、延长生长周期等方面。主要通过多倍体育种技术培育具有优良性状的新品种并最终应用于水产养殖的大规模生产。目前多倍体的研究和开发已经取得了令人瞩目的成就，培育出了大量多倍体新品种，提高了水产养殖业的经济效益和生态效益。但在多倍体鱼类的研究和开发中还存在很多问题。相信在多倍体鱼类研究者的共同努力之下，多倍体鱼类的研究和开发的理论和技术会更加的完善和成熟。 多倍体鱼类开发利用的意义 多倍体鱼类的开发和利用是目前水产养殖领域的热点问题。由于三倍体鱼类在生长优势、群体产量及抗逆性等各方面都具有二倍体所无法比拟的优势，对于提高水产品的质量，提高水产养殖的经济效益具有重大的意义。同时，由于三倍体鱼具有不育的特性，三倍体鱼的培育和利用对控制养殖鱼类的过度繁殖和保护天然种质资源也具有极其重要的意义。而四倍体鱼可以达性成熟并繁育后代，与二倍体鱼类杂交即可产生大量三倍体。因此，多倍体鱼类的研究一直受到人们的高度重视，并取得了令人目的成就。 多倍体鱼类产生的生物学原理 多倍体是由于细胞内染色体加倍而形成的。染色体的加倍可以通过阻止卵细胞第二极体的排出即抑制卵细胞的第二次成熟卵裂或抑制受精卵的第一次卵裂来实现。多倍体鱼类产生的生物学原理为：对二倍体鱼来讲，成熟的卵子处于第二次减数分裂的中期有2组染色体，此时精子（具一组染色体）入卵后，刺激卵子继续完成第二次减数分裂，卵内的1组染色体作为第二极体排出卵外，另1 组染色体与精子带入的那组染色体结合，则受精卵成为正常的二倍体开始发育。如果在精子进入卵细胞之后但第二极体还没有排出之前，运用人工干预的方法如温度休克、静水压法和化学药物等方法处理这时的受精卵，阻止第二极体的排出即阻止第二次减数分裂的进行则形成三倍体。如果卵子和精子结合后正常的排出第二极体，但是采用人工的方法阻止受精卵第一次卵裂的进行则形成四倍体。 目前多倍体鱼类开发的方法 目前运用于有诱导多倍体的方法主要有三种方法即生物学方法、物理方法和化学方法。 3.1生物学方法 目前采用最普遍的生物学方法是远源杂交即采用不同物种间的杂交来诱导多倍体的产生。例如用雌性草鱼(2n=48)与雄性三角鲂(2n=48)杂交获得子一代染色体数目为72 的草鲂杂种三倍体，其中草鱼提供了二倍数目的染色体(48)，三角鲂提供了单倍数目的染色体(24)。通过不同物种间的杂交获得多倍体的机理仍需要进一步的研究。 此外，生物学方法还有核移植和细胞融合这两种方法。目前细胞移植的方法仍然处在实验的阶段，仅得到多倍体的心跳期胚胎或嵌合体仔鱼。该方法的成熟, 很可能成为诱导四倍体鱼类的有效途径之一。细胞融合主要诱导鱼类囊胚细胞与囊胚细胞、囊胚细胞与未受精卵、囊胚细胞与受精卵或者受精卵与受精卵之间的细胞融合, 但由于细胞内的染色体发生重排，实际上得到的是含有各种不同数量染色体的细胞群。但该方法可以用于探索品种的改良。 3.2物理方法 目前采用的诱导多倍体的物理方法主要有温度休克法（热休克和冷休克）、静水压法和电休克法三种方法。 3.2.1温度休克法 温度休克法包括热休克和冷休克，即用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导三倍体或四倍体的方法。冷休克采用的温度一般为0℃左右，热休克采用的温度一般为28～36℃。一般来说为了提高诱导的刺激强度，一般冷水性鱼类宜采用热休克的方法，温水性的鱼类以宜冷休克。但最近研究表明, 鲤鱼用热休克同样可以获得较高比例的三倍体, 香鱼三倍体的诱导用冷、热休克均可获得令人满意的结果。该方法的关键是把握开始处理时间、持续处理时间和处理温度三者之间的关系。因为不同鱼类的遗传背景、生活习性、栖息环境各不相同，因此在诱导多倍体时不同的鱼类要采用不同的开始处理时间、持续处理时间和最佳的处理温度。目前，温度休克法应用比较广泛，其操作简便，成本低。但是掌握最佳的处理条件较为困难。 3.2.2静水压法 静水压法是采用静水压处理从而阻止卵细胞的第二极体的排出或者阻止第一次卵裂从而产生三倍体或者四倍体的方法。该方法的关键是要掌握开始处理的时间、持续处理的时间和采用的水静压值三者之间的关系。目前，有关成功研究的静水压一般在450kg/cm2～650kg/cm2 之间，该方法诱导率高，处理时间短，且对受精卵损伤小。但是该方法依赖于专用的设备即