硒降低db小鼠血糖李奎精读.pptx

李奎中国农业科学院北京畜牧兽医研究所硒降低db小鼠血糖的分子机制研究汇报提纲课题介绍主要进展成果统计后期计划经费决算课题介绍微量元素硒是动物和人体必需的营养元素，在一些重要的抗氧化酶和含硒蛋白中是必需的组成部分，在体内起着平衡氧化还原氛围的作用硒蛋白基因超家族：GPx、Dio、TrxR、SelP等至少25种硒蛋白课题介绍Osamu等报道在大鼠脂肪细胞中，硒与胰岛素一样可以增强葡萄糖的转运能力，硒和胰岛素都能够刺激与胰岛素敏感的葡萄糖转运蛋白(transporter，GLUT)的活性，从而加速葡萄糖的运输和降低机体血糖Theinsulin-likeeffectsofselenateinratadipocytes.J.Biol.Chem.(1990)Clements等报道了在大鼠肌肉组织中，硒能够增强同化或异化反应通道而促进葡萄糖的分解和转运，但不能促进葡萄糖转化成糖原的形式Insulin-likevs.non-insulinstimulationofglucosemetabolismbyvanadium,tungstenandseleniumcompoundsinratmuscle.LifeSci.(1996)课题介绍糖尿病db小鼠经补硒(Selenate，硒酸钠)处理后，改善了胰岛素敏感性，外周组织的胰岛素抵抗显著降低Compendiumoftheantidiabeticeffectsofsupranutritionalselenatedoses.JNutr.Biochem.(2006)STZ(链脲佐菌素)诱导的糖尿病大鼠补硒处理后，其抗氧化酶活性增强，血糖、糖化血红蛋白、脂质过氧化产物均下降，以及引起氧化应激的RAGE(糖化终末产物受体)和炎症反应的NFkB也下调，糖尿病症状缓解SeleniumDownregulatesRAGEandNFκBExpressioninDiabeticRats.BiolTraceElemRes.(2012)课题介绍研究证明，硒在糖尿病病理过程中，有降低血糖和调控胰岛素介导的代谢过程等拟胰岛素作用，但其具体机制仍不清楚本课题旨在通过基因表达谱芯片扫描、microRNA差异表达及其靶标预测和功能验证、蛋白质谱分析和组织切片分析等技术，从基因组学、表观遗传学、蛋白质组学和病理学等多方面深入探讨微量元素硒及其代谢通路参与影响糖脂代谢通路和胰岛素信号传导通路的过程，探索硒缓解糖尿病高血糖症状的分子机理课题思路主要内容及进展db小鼠模型的灌胃给硒处理及表型指标检测组织病理切片制备与观察肝脏、胰腺组织转录组表达谱芯片扫描肝脏组织microRNA芯片扫描和蛋白质谱分析综合分析，预测可能的代谢机理糖尿病动物模型构建db小鼠给硒处理小鼠模型：C57BL/KsJ-db/db，LepR自发突变肥胖DM组(db-/-，n=30)、正常NC组(db+/+，n=20)雄性♂，6周龄硒剂：硒酸纳(sodiumselenate，Sigma)水溶液剂量：按小鼠的LD50(~3.5mg/kgBW)的5%~25%剂量给药每天定时定点灌胃给硒和水，为期9周检测：每周测一次体重和空腹血糖实验结束后采全血，检测糖化血红蛋白和血清胰岛素屠宰取胰腺、肝脏组织冻存、固定db-/-db+/+体重与空腹血糖变化体重变化基本不受影响DM组给硒处理组FBG显著下降NC组给硒处理不影响FBG正常值糖化血红蛋白变化糖化血红蛋白(HbA1c)可以稳定可靠地反映出一段时间的平均血糖水平，且受抽血时间，是否空腹，是否使用胰岛素等因素的干扰不大，因此可以很好地反映血糖被控制的情况db小鼠给硒组：血糖控制良好，显著下降正常小鼠对照组：血糖正常稳定，给硒不影响胰岛素变化以DM肥胖小鼠为对照组(DM-C)，根据血清胰岛素变化，把血糖显著降低的DM硒处理组分成两组：胰岛素升高组(DMSe-H)、胰岛素降低组(DMSe-L)可能的机制：胰岛素升高组(H)：改善胰岛素合成与分泌，提高血液胰岛素水平，降低血糖胰岛素降低组(L)：改善了外周组织的胰岛素敏感性，促进血糖的利用，降低血糖DM-CDMSe-LNCDMSe-Hliverpancreas100µm100µm100µm100µm100µm100µm100µm100µmDM对照组（DM-C）胰岛细胞与周边组织界限不清，大小形态不规则肝细胞脂肪变性和空泡化显著胰岛素升高组（DMSe-H）胰岛细胞显著增生，体积增大肝细胞脂肪变性和空泡化显著胰岛素降低组（DMSe-L）胰岛细胞与周边组织界限较清楚肝细胞脂肪变性和空泡化程度降低组织病理学分析转录组学芯片分析转录组表达谱芯片扫描：Roche NimbleGen设计：DM-C、DMSe-H、DMSe-L三个组差异基因筛选数目统计：　肝脏胰腺上调下调上调下调DMSe-HvsDM-C65393