生物分离初级分离分析.ppt

体系的温度只需控制在室温条件下； 沉淀的颗粒较大，产物易收集；PEG非但不会使大多数蛋白质变性，且可提高其稳定性。 优点 缺点 PEG难从蛋白质溶液中除去。 聚电解质是含有重复离子化基团的水溶性聚合物，可用于蛋白质沉淀的聚电解质有聚丙烯酸、聚乙烯亚胺、羧甲基纤维素和离子型多糖如肝素等。 机理：蛋白质分子的相反电荷与聚电解质结合，形成一个多分子络合物，类似于絮凝，起架桥作用，当络合物超过游离蛋白质的溶解度极限值时，就发生沉淀。另外，还有盐析和降低水化程度的作用。 5、聚电解质沉淀法 1. 能与羧基、胺基等含氮化合物以及含氮杂环化合物强烈结合的金属离子，如：Mn2+、Fe2+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Zn2+、Cd2+； 6、金属沉淀法 沉淀机理：金属离子与蛋白质分子中的特殊部位起反应造成的。 金属离子沉淀蛋白质可分为三类： 2. 能与羧酸结合而不与含氮化合物结合的金属离子，如：Ca2+、Ba2+、Mg2+、Pb2+； 3. 与巯基化合物强烈结合的金属离子，如：Hg2+、Ag+、Pb2+。 实际使用时，金属离子的浓度常为0.02 mol/L。 7、其它沉淀方法——  （1）亲和沉淀 亲和沉淀是利用蛋白质与特定的生物的或合成的分子(免疫配位体、基质、辅酶等)之间高度专一性的相互作用而设计出来的一种特殊选择