THP―1分化的巨噬细胞来源Exosomes的生物学特征鉴定.docVIP

THP―1分化的巨噬细胞来源Exosomes的生物学特征鉴定 　　摘要：利用佛波酯体外分化人急性单核白血病细胞形成巨噬细胞，并用低温超速离心法从巨噬细胞培养上清收集Exosomes，并分析其生物学特征。Exosomes经透射电显微镜分析形态，并用Western blot方法分析Exosomes膜上特异性蛋白CD80、ICAM-3、HSP-70的表达对其生物学特征进行鉴定。研究结果表明佛波酯成功诱导人急性单核白血病细胞分化成人巨噬细胞。获得的巨噬细胞分泌微小囊泡经透射电镜分析后，微小囊泡的直径在30～100nm，并且其含有Exosomes的特征性蛋白CD80、ICAM-3、HSP-70等蛋白，表明其为Exosomes，使用低温超速离心法成功收集到Exosomes，为后续开展Exosomes的成份及功能分析提供了保障。 　　关键词：巨噬细胞：Exosomes；透射电镜；超速离心 　　中图分类号：Q28 　　文献标识码：A 　　文章编号：1007-7847（2014）04-0283-03 　　Johnstone等研究网织红细胞发育时，发现网织红细胞成熟过程中会分泌出一种囊泡状物质，于是分离纯化了该物质并命名为Exosomes。目前研究认为Exosomes由细胞内多泡体（muiti-vesicular body， MVB）与细胞膜融合后，释放到细胞外基质中的一种直径约3