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- 2016-08-27 发布于贵州
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不同浓度秋水仙素和nocodazole对绒山羊成纤维细胞周期同步化的影响
杨惠茹,肖红梅,蔡婷,俎红丽,于新蕾,刘志红,李金泉,王志新
( 内蒙古农业大学 动物科学学院动物遗传育种与繁殖重点实验室,呼和浩特 010018 )
摘要:本文旨在探索更加优化的条件,使绒山羊成纤维细胞经处理后更多的处于有丝分裂G2/M 期。本研究分别采用秋水仙素和nocodazole (诺考达唑)试剂对绒山羊成纤维细胞进行周期同步化处理,用流式细胞仪检测G2/M 期的细胞数量进行比对,观测最佳作用浓度。结果表明,秋水仙素的使用浓度不宜过大;其次,添加秋水仙素时间的不同也会对试验结果产生明显的影响。另外在相同条件下,经nocodazole处理的绒山羊成纤维细胞周期同步化效果比秋水仙素好,最优的处理条件是300 ng/mL nocodazole处理成纤维细胞24 h,所得G2/M期的细胞所占比例为15.10%。结果提示对于绒山羊的成纤维细胞来说,细胞周期同步化处理时,选择nocodazole更好一些。
关键词:绒山羊;成纤维细胞;秋水仙素;nocodazole(诺考达唑);细胞周期同步化;流式细胞仪
Dolezel等(2011) 报道随着测序技术的发展,使用流式细胞仪分离单条染色体,将拓展测序技术应用的领域,对于山羊这种大基因组动物更有广泛的应用价值。流式细胞术可以分选出指定的染色体,能快速精确
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