1~生物信息学导论.ppt

双向凝胶电泳 20世纪80年代开始采用固相化pH梯度技术（immobilized pH gradients，IPG），可以随意精确设定pH梯度。 由于可以建立很窄的pH范围，对特别感兴趣的区域可在较窄的pH范围内做第二轮分析，从而大大提高了分辨率，因此基本上解决了双向凝胶电泳重复性的问题，这是双向凝胶电泳技术上的一个非常重要的突破。 其他技术 高效液相色谱（HPLC）基于样品分子在固定相 柱填料 和流动相 淋洗液 之间的特殊相互作用而实现样品的分离。 常用于相对分子质量小于l×l03的蛋白质、膜蛋白及低丰度蛋白质的分离。 毛细管电泳技术（CE）是在高电场强度作用下，对毛细管 内径5-10 μm 中的样品按分子质量、电荷、电泳迁移率等差异进行有效分离。 3.3 蛋白质鉴定技术质谱技术 mass spectrometry，MS 蛋白质组学中最有意义的突破是用生物质谱鉴定电泳分离后的蛋白质。该技术是一种超灵敏的鉴定技术，从理论上说，仅需极少量的样品就可以获得错误率低于1/1000000的精确结果。可将现行的质谱仪简单地分为三个连续的组成部分，即离子源、离子分离区和检测器。 质谱分析法是通过对样品离子的质荷比和强度的测定来进行定性和定量分析的一种分析方法。质谱分析法的过程是：首先将样品气化为气态分子或原子，然后将其电离失去电子，成为带正电离子，再将离子按质荷比大小顺序排列起来，测